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1、目的:通過檢測(cè)雙孔鉀離子通道蛋白TASK-3在腎透明細(xì)胞癌組織和786-0腎癌細(xì)胞中的表達(dá)情況,分析TASK-3抑制劑對(duì)786-0腎癌細(xì)胞株增殖的影響,探討TASK-3在腎癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
方法:分別采用熒光定量PCR和免疫組織化學(xué)技術(shù)分別檢測(cè)TASK-3在30例新鮮腎透明細(xì)胞癌組織及配對(duì)的正常腎組織中和30例石蠟包埋腎透明細(xì)胞癌組織及配對(duì)正常腎組織中mRNA及蛋白表達(dá)情況,探討其與臨床病理特征之間的關(guān)系;通過免疫熒光染色
2、技術(shù)檢測(cè)TASK-3在腎透明細(xì)胞癌株786-0中的表達(dá)情況,并采用MTS比色法分析加入不同濃度的TASK-3抑制劑精胺后腎癌細(xì)胞的增殖情況。
結(jié)果:TASK-3mRNA在腎透明細(xì)胞癌組織的相對(duì)表達(dá)量遠(yuǎn)高于配對(duì)的正常腎組織(中位數(shù)±四分位間距分別為(2.33±8.89)×10-4、(0.13±3.90)×10-4),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Shapiro-Wilcoxon秩和檢驗(yàn),P=0.029);TASK-3蛋白在近83.33%(2
3、5/30)的腎癌組織呈高表達(dá),其陽(yáng)性表達(dá)主要位于細(xì)胞膜,而僅在13.33%(4/30)的正常腎癌組織中呈高表達(dá)狀態(tài),在其余的26例(86.67%)正常腎組織中均呈低表達(dá),其中部分甚至未見表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Fisher確定概率法,P<0.001)。TASK-3mRNA定量及蛋白表達(dá)趨勢(shì)基本一致,但二者和腫瘤分期、分級(jí)等臨床病理特征均無(wú)明顯關(guān)系(P>0.05);TASK-3在786-0腎癌細(xì)胞膜和細(xì)胞核中都呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng),且通過加入抑制
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