高氧環(huán)境下小腸SIgA、Occludin蛋白及腸道分泌片表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的：
　　研究持續(xù)高氧環(huán)境下新生大鼠腸黏膜sIgA、腸道分泌片及occludin蛋白的表達(dá)變化,探討在持續(xù)高氧環(huán)境下三者表達(dá)變化的意義及對(duì)腸道的影響,為進(jìn)一步研究持續(xù)高氧環(huán)境下三者作用的分子生物學(xué)機(jī)制及相關(guān)靶向治療奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　將80只足月新生Wistar大鼠隨機(jī)分為高氧組(n=60)及空氣對(duì)照組(n=20),將高氧組新生大鼠置于持續(xù)高氧環(huán)境下(氧濃度90％～95%)飼養(yǎng),分別于第14d及第21d從高氧

2、組和空氣組各隨機(jī)抽取出10只大鼠,處死開腹后取出中段小腸以PBS沖洗腸腔,至腸腔干凈。小腸黏膜組織甲醛固定后HE染色觀察小腸黏膜組織病理學(xué)改變。小腸黏膜組織置于OCT包埋液氮保存做冰凍切片,使用免疫熒光法分別檢測SC、occludin蛋白表達(dá)。提取腸黏膜組織蛋白,使用Elisa直接檢測法檢測sIgA表達(dá)情況。提取黏膜組織蛋白,使用Western blotting方法檢測occludin蛋白及腸道分泌片蛋白表達(dá)量的變化。
　　結(jié)果：

3、
　　中段小腸組織病理切片做HE染色光鏡下觀察,可見出生14d和21d空氣對(duì)照組大鼠腸絨毛完整,高氧組出生14d和21d大鼠小腸絨毛普遍較短,黏膜細(xì)胞部分脫落,多數(shù)黏膜細(xì)胞內(nèi)有空泡形成,細(xì)胞外間質(zhì)中存在不同數(shù)量炎癥細(xì)胞浸潤。Elisa方法檢測高氧組及空氣對(duì)照組14d及21d的sIgA含量提示差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),且高氧組sIgA含量較空氣對(duì)照組高;免疫熒光及Western blotting法檢測腸道分泌片提示高氧組

4、與空氣對(duì)照組14d及21d的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),且高氧組較對(duì)照組高;高氧組occludin蛋白表達(dá)量較空氣對(duì)照組比較相對(duì)有減少,但其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　持續(xù)高氧作用下,新生大鼠腸道形態(tài)學(xué)改變,腸道黏膜損傷,新生大鼠腸黏膜分泌sIgA及腸道分泌片均增多,增強(qiáng)腸道抵御細(xì)菌、毒素的能力,提高腸道的免疫功能,以保持腸道黏膜屏障的完整性。SIgA及SC在應(yīng)對(duì)腸道損傷中有相當(dāng)重要的協(xié)同作用,