生物學(xué)標(biāo)志物在缺血再灌注急性腎損傷模型和藥物性急性腎損傷模型中的比較及藥物干預(yù)的觀察.pdf

1、目的:建立大鼠腎缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury，IRI)模型及藥物性腎損傷模型，后予還原型谷胱甘肽藥物干預(yù)，通過檢測不同階段單核細(xì)胞趨化蛋白-l(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-l)、腎損傷分子-l(kidney injury molecule-1，KIM-l)、胱抑素C（Cystatin C，Cys C）在血清和尿液中的表達(dá)情況來探尋不同類型急性腎損

2、傷生物學(xué)標(biāo)志物的比較以及還原型谷胱甘肽藥物干預(yù)的療效，為尋求AKI有效的預(yù)防措施提供試驗及理論依據(jù)。
　　方法:制備大鼠腎缺血再灌注損傷模型及大鼠藥物性腎損傷模型，分為對照1組、缺血模型組、藥物干預(yù)1組、對照2組、藥物模型組、藥物干預(yù)2組。在AKI后的不同時間點(diǎn)收集血液、尿液以及腎臟組織，采用全自動生化分析儀測定血肌酐（Scr）、尿素（UREA），采用ELISA法測定血清及尿液中MCP-1、KIM-1、Cys C的表達(dá)情況，采用免

3、疫組化檢測腎臟組織中MCP-1、KIM-1、CystatinC的表達(dá)情況，并行腎臟病理檢查。
　　結(jié)果：1.與對照1組比較，缺血模型組Scr和UREA分別于腎臟缺血再灌注4h和6h后有明顯升高（P＜0.01），與對照2組比較，藥物模型組Scr和UREA分別于藥物腎損傷6h有明顯升高（P＜0.05）。
　　2.與對照1組比較，隨著腎臟缺血再灌注時間的延長，缺血模型組血清中Cysc、KIM-1、MCP-1的表達(dá)分別于2h、1h和

4、15min后有升高（P＜0.05），尿液中Cysc、KIM-1、MCP-1的表達(dá)分別于2h、30min和1h后有升高（P＜0.05）；與對照2組比較，隨著藥物性損傷的延長，藥物模型組血清中 Cys C、KIM-1、MCP-1的表達(dá)分別2h、4h和2h有升高（P＜0.05）,尿液中Cys C、KIM-1、MCP-1的表達(dá)分別4h、1h和2h有升高（P＜0.05）。
　　3.在缺血再灌注損傷模型中，血清中MCP-1的表達(dá)在15min時

5、即有明顯升高，在6h時呈峰值，而后隨時間延長呈下降趨勢；而血清中MCP-1在藥物性腎損傷模型中2h后才有明顯升高，且其隨時間延長呈上升趨勢。
　　4.腎組織形態(tài)學(xué)動態(tài)變化：①肉眼觀察：對照1組、對照2組大鼠腎臟的大小、形態(tài)、色澤基本正常；缺血模型組腎臟腫大，皮質(zhì)部位蒼白缺血，髓質(zhì)部位暗紅淤血；藥物模型組腎臟變大、水腫，色澤加深呈紫黑色，表面有出血點(diǎn)。②光鏡觀察：對照1組、對照2組腎臟結(jié)構(gòu)完整，腎小球、皮髓交界處的腎小管及髓質(zhì)處腎小

6、管清晰可見，缺血模型組早期腎小球內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤，腎小管上皮細(xì)胞可見輕度腫脹，髓質(zhì)部改變不明顯，隨時間延長，損害呈加重趨勢，嚴(yán)重出現(xiàn)變形壞死等表現(xiàn)；藥物模型組早期腎小球輕度腫脹，腎小囊腔隙增寬，近曲小管上皮細(xì)胞部分胞漿紅染、顆粒腫脹、水樣變性，遠(yuǎn)曲小管內(nèi)可見管型形成，腎間質(zhì)輕度充血；隨著時間的延長腎小球腫脹加重明顯，腎小管上皮細(xì)胞崩解、壞死，遠(yuǎn)端小管內(nèi)形成大量蛋白管型，及由大量小管壞死、脫落上皮細(xì)胞形成的細(xì)胞管型。
　　5.免疫組

7、化顯示，對照1組、對照2組中腎臟組織中基本無MCP-l、KIM-1以及Cys C的表達(dá)，而缺血模型組、藥物模型組中大鼠腎臟Cys C、KIM-1和MCP-1的表達(dá)明顯升高。
　　6.與缺血模型組比較，隨藥物干預(yù)時間的延長，藥物干預(yù)1組血清和尿液中Cysc、KIM-1、MCP-1的表達(dá)升高幅度均小于缺血模型組（P＜0.05），與藥物模型組比較，藥物干預(yù)2組中Cysc、KIM-1、MCP-1的表達(dá)升高幅度均小于藥物模型組（P＜0.05

8、）。
　　結(jié)論：1.在缺血模型及藥物模型中，血清和尿液中 KIM-1、CysC的表達(dá)是隨著缺血再灌注時間的延長呈上升趨勢，但二者在缺血模型中的表達(dá)時間要早于在藥物模型中的表達(dá)。
　　2. MCP-1在缺血模型中的表達(dá)亦早于在藥物模型中的表達(dá)，但在缺血模型中，血清和尿液中MCP-1的表達(dá)分別在缺血再灌注15min和1h后即有明顯升高，在6h時呈峰值，而后隨時間延長呈下降趨勢；而在藥物模型中，血清和尿液MCP-1的表達(dá)分別在2h