大鼠腎缺血再灌注損傷的生物學(xué)標(biāo)志物的比較研究.pdf

1、目的:通過建立大鼠腎缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury，IRI)造成的缺血性急性腎損傷（ischemic acute kidney injury，iAKI)模型，觀察iAKI不同階段單核細(xì)胞趨化蛋白-l(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-l)、腎損傷分子-l(kidney injury molecule-1，KIM-l)、胱抑素C（Cystatin C，Cy

2、s C）在血清和尿液中的表達(dá)有何不同及各自表達(dá)水平的規(guī)律,并根據(jù)這些因子的表達(dá)情況判斷哪些因子更敏感？
　　方法:制備大鼠腎IRI模型，分為假手術(shù)（Sham）組和缺血再灌注（I/R）模型組。在iAKI后的不同時(shí)點(diǎn)收集血液和尿液，全自動(dòng)生化分析儀檢測血清肌酐（Serum creatinine，Scr）和尿素（UREA）；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immuno sorbent assay，ELISA）法測定血清

3、和尿液中MCP-1、KIM-1和Cys C的表達(dá)；運(yùn)用免疫組化檢測腎臟組織MCP-1、KIM-1和Cys C的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.隨著缺血再灌注時(shí)間的延長，模型組大鼠Scr和UREA水平逐漸升高，分別在再灌注4 h和6 h后顯著升高，與Sham組相比差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。說明當(dāng)腎缺血再灌注一段時(shí)間后腎臟功能受損。
　　2.再灌注不同時(shí)期大鼠血清和尿液中MCP-1、KIM-1、Cys C均高于Sham組。模型

4、組MCP-1、KIM-1和Cys C的升高均早于Scr和UREA，KIM-1和Cys C的升高程度與再灌注時(shí)間成正比，而MCP-1在6 h達(dá)到高峰，12 h后開始下降，24 h后繼續(xù)下降，仍顯著高于Sham組。
　　3.模型組大鼠在血清標(biāo)本中，MCP-1表達(dá)時(shí)間最早，其次是KIM-1、Cys C；在尿液標(biāo)本中，KIM-1表達(dá)時(shí)間最早，其次是MCP-1、Cys C。
　　4.免疫組化顯示，在Sham組腎臟基本無MCP-l、KI

5、M-1以及Cys C表達(dá)。模型組大鼠腎臟MCP-1、KIM-1和Cys C的表達(dá)與Sham組相比均有不同程度的升高，分布在外髓的近端小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)中，也有少量表達(dá)在腎小球的系膜區(qū)和毛細(xì)血管內(nèi)，其中以小管上皮細(xì)胞表達(dá)為主。
　　結(jié)論：1.不同的生物學(xué)標(biāo)志物在同一標(biāo)本中的敏感度不同：其中MCP-1在血清中表達(dá)最敏感，KIM-1在尿液中表達(dá)最敏感；在血清和尿液中，MCP-1和KIM-1的表達(dá)均比Cys C敏感。
　　2.尿液中