水通道蛋白4、5在卵巢上皮性癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、背景和目的:
　　 卵巢癌是女性生殖器三大惡性腫瘤之一,發(fā)病率呈上升趨勢(shì),由于卵巢位置較深,發(fā)病隱匿,早期發(fā)病癥狀和體征不明顯,且卵巢癌易于轉(zhuǎn)移和廣泛播散,75％患者出現(xiàn)癥狀就診時(shí)已屬晚期,5年生存率一直徘徊在30％左右,死亡率最高,居?jì)D科惡性腫瘤之首。近年來卵巢癌浸潤轉(zhuǎn)移的機(jī)制已備受關(guān)注,因此深入研究卵巢癌浸潤轉(zhuǎn)移的機(jī)制,尋找能抑制轉(zhuǎn)移的方法將對(duì)臨床治療工作有很大的指導(dǎo)作用。
　　 水通道蛋白(Aquaporin,AQ

2、Ps)是一組主要介導(dǎo)水的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白質(zhì),主要包括AQP0～AQP12,能顯著增加細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,主要參與調(diào)節(jié)水分子及其他小分子的分泌、吸收及細(xì)胞膜的穩(wěn)定性。AQP是一種糖蛋白,分子質(zhì)量約30ku左右。根據(jù)其對(duì)水和其他溶質(zhì)的通透性差異,AQPs可分為兩個(gè)亞族:其中AQP3、AOP7、AQP9、AQP10為一亞族,其余者為另一亞族。前者對(duì)水具有相對(duì)選擇的通透性,即除轉(zhuǎn)運(yùn)水外還轉(zhuǎn)運(yùn)尿素和(或)甘油；后者只允許水分子通過,對(duì)水的轉(zhuǎn)運(yùn)具有高

3、度專一性。近年研究發(fā)現(xiàn)水通道蛋白在多種腫瘤組織中表達(dá)量有改變,癌細(xì)胞比正常細(xì)胞更需要水分子的快速跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。AQPs可能促進(jìn)腫瘤新生血管的形成和腫瘤細(xì)胞的遷移,參與腫瘤的增殖和浸潤轉(zhuǎn)移。另外有研究認(rèn)為AQPs可能具有致癌性,水通道蛋白cDNA的異位表達(dá)可引起許多表現(xiàn)型的改變,包括細(xì)胞增殖活性的加強(qiáng),非依賴生長的增殖細(xì)胞固定等,水通道蛋白與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究已引起廣泛關(guān)注?，F(xiàn)有關(guān)水通道蛋白與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究較少,僅見少數(shù)AQP1

4、、AQP3、AQP5等在卵巢上皮性腫瘤上表達(dá)的報(bào)道,尚未見到有關(guān)AQP4與卵巢上皮性腫瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系的探討研究。該實(shí)驗(yàn)采用免疫組化和原位雜交法檢測(cè)了AQP4、5蛋白及mRNA在原發(fā)性卵巢上皮性腫瘤組織中的分布及表達(dá)情況,并分析兩種蛋白及mRNA與卵巢上皮性癌的臨床病理指標(biāo)的關(guān)系及兩者表達(dá)的相關(guān)性,從而從蛋白及基因水平探討水通道蛋白4和水通道蛋白5在卵巢上皮性癌發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移機(jī)制中的意義。
　　 材料和方法:
　　 1

5、、病例資料收集鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科2006年1月至2009年12月手術(shù)切除標(biāo)本,病例標(biāo)本均經(jīng)常規(guī)HE染色并經(jīng)本院病理科明確診斷。90例標(biāo)本中,10例正常卵巢組織、15例卵巢良性腫瘤、15例卵巢交界性腫瘤及50例卵巢上皮性癌(漿液性囊腺癌28例,粘液性囊腺癌15例,內(nèi)膜樣癌7例)。患者年齡最大為80歲,最小為18歲,平均47.12±6.59歲。卵巢癌中按FIGO(2000年)臨床分期,Ⅰ期8例,Ⅱ期10例,Ⅲ期23例,Ⅳ期9例；根據(jù)

6、組織學(xué)分級(jí)(WHO2003年)標(biāo)準(zhǔn):高分化13例,中分化18例,低分化19例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者29例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者21例；有腹水者34例,無腹水者16例。所有患者術(shù)前均未接受任何化療、放療和免疫治療,臨床及病理資料完整。
　　 2、實(shí)驗(yàn)方法采用免疫組化SP法及組織原位雜交法檢測(cè)80例卵巢原發(fā)性上皮性腫瘤組織和10例正常卵巢組織中的AQP4和AQP5蛋白及mRNA的表達(dá)情況,并分析這兩種蛋白的表達(dá)與各臨床和病理參數(shù)的關(guān)系及二者的相

7、關(guān)性。
　　 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,多個(gè)樣本率比較采用行×列表x檢驗(yàn),Fisher確切概率法,兩個(gè)樣本率的比較采用四格表x2檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。以a=0.05,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、AQP4和AQP5蛋自在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)AQP4和AQP5蛋白在卵巢上皮性腫瘤組織中的陽性表達(dá)率隨著組織良性、交界性、惡性的轉(zhuǎn)

8、變依次升高,分別為良性26.7％(4／15)和33.3％(5／15),交界性60.0％(9／15)和73.3％(11／15),惡性76.0％(38／50)和84.0％(42／50)；而在正常卵巢組織中陽性表達(dá)率較低,為10.0％(1／10)和20.0％(2／10),整體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4:x2=23.382；AQP5:x2=24.105,P<0.01)；AQP4、5蛋白在卵巢上皮性癌組織中的陽性表達(dá)顯著高于正常卵巢組織中的表

9、達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4:x2=13.187；AQP5:x2=14.335,P<0.01)。
　　 2、AQP4和AQP5mRNA在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)AQP4和AQP5mRNA在卵巢上皮性腫瘤組織中的陽性表達(dá)率隨著組織良性、交界性、惡性的轉(zhuǎn)變依次升高,分別為良性無表達(dá),交界性40.0％(6／15)和46.7％(7／15),惡性54.0％(27／50)和66.0％(33／50)；而正常卵巢組織中陽性表達(dá)率為零,整體比較差

10、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4:x2=29.104；AQP5:x2=38.822,P<0.01)；AQP4、5mRNA在卵巢上皮性癌組織中的陽性表達(dá)顯著高于正常卵巢組織中的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4:x2=13.582；AQP5:x2=17.202,P<0.01)。
　　 3、AQP4蛋白及mRNA的表達(dá)與卵巢上皮性癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系卵巢上皮性癌組織中AQP4蛋白及mRNA表達(dá)較一致。Ⅲ、Ⅳ期癌組織中陽性表達(dá)高于Ⅰ、Ⅱ期癌組織

11、中的表達(dá),兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4-蛋白:x2=4.813,AQP4-mRNA:x2=4.836,P<0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織中AQP4的表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4-蛋白:x2=3.944,AQP4-mRNA:x2=6.226,P<0.05)；中低分化的癌組織中AQP4的表達(dá)高于高分化的癌組織,差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4-蛋白:x2=6.511,AQP4-mRNA:x2=6.763,P

12、<0.05)；有腹水者AQP4的表達(dá)高于無腹水者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP4-蛋白:x2=6.750,AQP4-mRNA:x2=7.966,P<0.05)；AQP4在各病理類型癌組織中的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4、AQP5蛋白及mRNA的表達(dá)與卵巢上皮性癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系卵巢上皮性癌組織中AQP5蛋白及mRNA表達(dá)較一致,中、低分化的癌組織中AQP5的表達(dá)高于高分化的癌組織,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP5

13、-蛋白:x2=4.530,AQP4-mRNA:x2=7.711,P<0.05)；有腹水者AQP5的表達(dá)高于無腹水者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AQP5-蛋白:x2=5.911,AQP5-mRNA:x2=8.517,P<0.05):AQP5在臨床分期、病理分型、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分組中的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 5、AQP4和AQP5蛋白及mRNA在卵巢上皮性癌組織表達(dá)的相關(guān)性 AQP4蛋白和AQP5蛋白,AQP4mRNA

14、和AQP5mRNA在卵巢上皮性癌組織的表達(dá)有相關(guān)性(r=0.366,0.334,P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、卵巢癌組織中高表達(dá)AQP4和AQP5,為卵巢癌細(xì)胞膜上提供了更多的水分子進(jìn)出的通道,可能參與了卵巢上皮性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及卵巢癌的浸潤轉(zhuǎn)移過程。
　　 2、AQP4和AQP5在有腹水組卵巢癌組織中高表達(dá),可增加卵巢癌細(xì)胞對(duì)水的通透性,促進(jìn)水分外滲,參與卵巢上皮性癌腹水的形成。
　　 3、