基因表達(dá)譜芯片技術(shù)篩選腎癌細(xì)胞OS-RC-2骨轉(zhuǎn)移相關(guān)基因.pdf

1、目的：建立腎癌細(xì)胞OS-RC-2骨轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型,獲得病灶腫瘤細(xì)胞株,并對(duì)兩組細(xì)胞間的基因表達(dá)譜進(jìn)行對(duì)比分析,篩選差異表達(dá)基因。
　　方法：通過(guò)脛骨平臺(tái)向脛骨髓腔內(nèi)注射OS-RC-2細(xì)胞,待局部成瘤后取病灶腫瘤細(xì)胞,循環(huán)注射,最后獲得的腫瘤細(xì)胞株與OS-RC-2細(xì)胞之間分別以MTT法檢測(cè)增殖能力,Transwell法檢測(cè)侵襲能力,流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期變化。提取兩組細(xì)胞的mRNA,通過(guò)基因芯片技術(shù)進(jìn)行雜交掃描和分析,結(jié)合KEGG網(wǎng)

2、站數(shù)據(jù)庫(kù)的信號(hào)通路分析,篩選出相關(guān)基因,并以RT-PCR及Westernblot法分別驗(yàn)證篩選出的基因在mRNA及蛋白水平上的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：建立腎癌骨轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型,獲得高骨轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞株OS-RC-2-BM-3,基因芯片掃描得到差異基因共1196個(gè),其中上調(diào)基因926個(gè),下調(diào)基因270個(gè),根據(jù)KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出HIF-1α及HSP90,RT-PCR結(jié)果及Western結(jié)果均與基因芯片掃描符合。
　　結(jié)論：腎癌細(xì)胞O