骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2對(duì)大鼠脂肪干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)的作用.pdf

1、目的：探討體外條件下不同濃度骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）對(duì)脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞的影響。 方法：本試驗(yàn)取3周齡雄性SD大鼠，頸部脫臼法處死，無菌條件下取出腹股溝脂肪墊。膠原酶-1消化分離，接種于含有胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)。在倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)情況。待細(xì)胞擴(kuò)增并生長(zhǎng)穩(wěn)定后，分別加8組不同BMP-2濃度（根據(jù)每組BMP-2濃度不同，分為無BMP-2組、100ng/ml BMP-2組、200ng/ml BM

2、P-2組、400ng/ml BMP-2組、800ng/ml BMP-2組、1000ng/ml BMP-2組、1200ng/ml BMP-2組、1600ng/ml BMP-2組）的誘導(dǎo)培養(yǎng)液進(jìn)行成骨細(xì)胞誘導(dǎo)。用堿性磷酸酶、Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色及礦化結(jié)節(jié)染色鑒定成骨細(xì)胞分化能力。采用MTT比色法進(jìn)行增殖分化活性比較。 結(jié)果：堿性磷酸酶、Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色及礦化結(jié)節(jié)染色均為陽性。與對(duì)照組OD均值相比：200ng/ml BMP

3、-2組、400ng/ml BMP-2組、800ng/ml BMP-2組、1200ng/ml BMP-2組、1600ng/ml BMP-2組有顯著性差異（P<0.05）；100ng/ml BMP-2組、1000ng/ml BMP-2組無顯著性差異（P>0.05）。各組OD值均數(shù)隨BMP-2濃度的增加先逐漸增大（0 ng/ml～400 ng/ml），達(dá)峰值后，又逐漸減少（800 ng/ml～1600 ng/ml）。 結(jié)論：大鼠脂肪組