壯肝逐瘀煎對纖維化大鼠肝臟微循環(huán)障礙的調控研究.pdf

1、目的：本實驗致力于研究壯肝逐瘀煎對纖維化大鼠血管活性物質內皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO），肝組織促血管新生因子（VEGF）、抑制血管生長因子血小板衍生生長因子（PDGF）的活性的基因表達，通過觀察壯肝逐瘀煎及其不同治法組合對肝臟微循環(huán)的干預作用，揭示其可能的防治肝纖維化、門靜脈高壓甚至預防癌變的機制，明確不同組方/治法作用規(guī)律。
　　方法：SPF級大鼠120只,雌雄各半,體重150-200 g,適應性喂養(yǎng)一周，隨機取16只

2、作為正常對照組（A組）。余下大鼠用四氯化碳（CCl4）法進行肝纖維化造模，在造模第4周后隨機挑選8只大鼠，處死后用于檢測肝纖維化。證實肝纖維化造模成功后，將剩下的大鼠按照隨機分配法分成病理模型組（B組）、大黃蟅蟲丸對照組（G組）及采用L8(27)設計方案，分析不同組方/治法的交互作用對壯肝逐瘀煎進行分組（C、D、E、F）4組，每組16只，采用CCl4復合法大鼠肝纖維化模型，A組和B組于4周后灌胃與治療組同容積的生理鹽水；C、D、E、F、

3、G組造模4周后分別給予壯肝逐瘀煎不同組方（C、D、E、F組）、大黃蟅蟲丸（G組）進行灌胃治療，造模后、用藥后第4周及用藥后第8周應用超聲微泡造影技術檢測不同實驗期各組大鼠肝臟微循環(huán)、肝臟微循環(huán)平均血流灌注量及門靜脈血流量。用藥治療后的第4周、第8周處死，剖取肝臟，HE染色后用光鏡觀察大鼠肝組織病理變化和采用ELISA、硝酸還原酶法檢測不同實驗期大鼠血清ET-1、NO的濃度，檢測不同實驗期各組大鼠肝組織促/抑血管新生因子（VEGF、PDG

4、F）的基因表達差異。
　　結果：
　　(1)一般情況：正常對照組中的實驗大鼠較為活躍，進食量和飲水量正常，皮毛致密光澤，體重隨著實驗的進行而持續(xù)性生升。模型組與藥物治療組在造模期間，大鼠活躍性降低，喜臥、不愛活動，皮毛稀疏無光澤。藥物治療組經藥物灌胃治療后，大鼠一般生長狀況較用藥前有不同程度的改善。
　　(2)肝組織HE染色光鏡下觀察：正常對照組大鼠肝臟肝小葉結構：肝臟標本肝小葉中間的中央靜脈及其周圍的肝細胞結構完整清

5、晰。造模后模型對照組的肝小葉結構排列紊亂，部分肝細胞出現(xiàn)壞死，形成假小葉結構。藥物治療組經藥物治療后，與模型組比較，肝小葉結構破壞明顯減輕，部分肝小葉條索狀纖維疏松變窄甚至消失。
　　(3)ELISA結果：B組與A組比較，肝纖維造模成功后，ET-1和NO血清含量較高（P<0.05）；C、D、E、F、G組與B組比較，藥物治療后，血清中的ET-1和NO血清含量明顯降低（P<0.05），其中C和G比較，壯肝逐瘀煎全方對肝纖維改善較為明顯

6、（P<0.05）。
　　(4)RT-PCR:藥物治療組VEGF及PDGF的表達量較模型組較低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，模型組與空白對照組比較(P<0.05)。
　?。?）超聲造影：模型組與空白對照組比較，P＜0.05；藥物治療組與模型對照組比較，P＜0.05；壯肝逐瘀煎全方組與大黃蟄蟲丸組比較，P＜0.05。
　　結論：
　　(1)壯肝逐瘀煎對肝纖維化大鼠的精神狀態(tài)，皮毛色澤，飲食情況，體重等一般情況

7、有改善作用。
　　(2)壯肝逐瘀煎顆粒能夠明顯減輕大鼠肝纖維化的程度，有比較強的抗肝纖維化作用。
　　(3)壯肝逐瘀煎能夠降低血清中ET-1和NO的濃度，組織肝纖維化的進展，達到能夠改善肝纖維的作用。
　　(4)壯肝逐瘀煎顆?？梢越档蚔EGE及PDGF的基因表達量，從肝組織內的血管再生程度進行控制，改善微循環(huán)，組織微血管的再生速度及再生程度，達到抗肝纖維化的作用。
　　(5)超聲造影：模型組與空白對照組比較，P＜