浙貝母堿逆轉(zhuǎn)肺癌A549-DDP細胞株多藥耐藥及其機理研究.pdf

1、目的:1.探討“痰邪致病”與肺癌多藥耐藥相關(guān)性的中醫(yī)理論。2.探討肺癌中醫(yī)證候與化療療效的相關(guān)性。3.探討浙貝母堿逆轉(zhuǎn)A549/DDP肺癌細胞株耐藥的作用及可能的機理。方法:1.梳理中醫(yī)學(xué)關(guān)于肺癌的古今文獻資料,采用“取象比類”的方法將“痰邪致病”與肺癌耐藥特點進行類比。2.回顧性分析282例肺癌患者中醫(yī)證候類型與化療療效的相關(guān)性,作為本論文的臨床工作基礎(chǔ)研究。3.以理論和臨床研究為基礎(chǔ),展開實驗研究,以A549/DDP耐藥肺癌細胞株為

2、研究對象,以川芎嗪做對照藥物,采用MTT法檢測細胞耐藥倍數(shù)、浙貝母堿的最佳逆轉(zhuǎn)耐藥濃度及逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù);用流式細胞儀檢測耐藥細胞凋亡率,細胞免疫熒光法檢測L-RP蛋白表達,RT-PCR檢測細胞ERCC1-mRNA表達。結(jié)果:1.通過文獻整理及“取象比類”的方法,論文提出“痰邪是肺癌多藥耐藥的重要病因,化痰散結(jié)法是治療肺癌多藥耐藥的基本治法”的假說。2.臨床研究顯示:正氣虧虛證型組較氣虛痰濕型組、氣血瘀滯型組和陰虛熱毒型組肺癌對化療有效率高

3、(64.1％),治療期間患者更少的出現(xiàn)疾病進展(19.6%)。正氣虧虛型與氣虛痰濕型兩組相比,氣虛痰濕型肺癌化療有效率低,更多的患者出現(xiàn)進展。中位腫瘤進展時間和總生存時間單純正氣虧虛證型組優(yōu)于其他各組。3.實驗研究顯示:A549/DDP耐藥倍數(shù)為13.08倍,細胞高度耐藥?？瞻讓φ战M、DDP組、川芎嗪實驗組、浙貝母堿實驗組各組隨DDP濃度的增加,藥物對A549/DDP細胞的抑制率不斷增加。川芎嗪實驗組逆轉(zhuǎn)倍數(shù)3.62,浙貝母堿實驗組逆轉(zhuǎn)

4、倍數(shù)3.73。流式細胞儀檢測凋亡發(fā)生率各組分別為2.56±0.44、13.5±1.42、33.82±4.56、38.16±2.25,川芎嗪實驗組和浙貝母堿實驗組與空白對照組和DDP組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。細胞免疫熒光測定的結(jié)果顯示,川芎嗪實驗組和浙貝母堿實驗組較空白對照組和DDP組的L-RP表達明顯降低(p＜0.05)。各組ERCC1mRNA表達分別為0.62±0.04、0.56±0.03、0.36±0.07、0.32±

5、0.08,川芎嗪實驗組和浙貝母堿實驗組與空白對照組和DDP組比較顯著降低了ERCC1mRNA的表達,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。結(jié)論:1.本論文理論研究部分提出假說,通過文獻整理及“取象比類”為假說提供了理論依據(jù)。理論研究的內(nèi)容豐富了中醫(yī)學(xué)對肺癌多藥耐藥的認識。2.臨床研究提示正氣虧虛型是晚期肺癌中預(yù)后較好的分型,氣虛痰濕型、氣血瘀滯型和陰虛熱毒型是晚期肺癌中預(yù)后較差的分型,推測肺癌的發(fā)生、發(fā)展可能遵從先出現(xiàn)正氣虧虛,而后合并出現(xiàn)