腺病毒介導(dǎo)的hIL-24基因?qū)Ψ蜗侔〢549-DDP細(xì)胞株耐藥性逆轉(zhuǎn)的研究.pdf

1、目的:
　?、偬接慉d-hIL-24基因體外對(duì)人肺腺癌耐順鉑A549/DDP細(xì)胞株的抑制作用；
　?、谔接慉d-hIL-24基因體外誘導(dǎo)人肺腺癌耐順鉑A549/DDP細(xì)胞凋亡變化；
　　③探討Ad-hIL-24基因逆轉(zhuǎn)人肺腺癌耐順鉑A549/DDP細(xì)胞耐藥性后PI3K/AKT信號(hào)通路變化情況。
　　方法:
　　①用Ad-hIL-24、DDP及Ad-hIL-24+DDP作用于A549/DDP細(xì)胞抑制細(xì)胞生長(zhǎng)；

2、
　?、趹?yīng)用CCK-8法檢測(cè)A549/DDP細(xì)胞增殖情況，計(jì)算抑制率；
　?、蹜?yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)A549/DDP細(xì)胞凋亡的變化；
　?、軕?yīng)用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)Akt，P-Akt，P-gp蛋白表達(dá)含量變化。
　　結(jié)果:
　　①在適宜培養(yǎng)條件下，QBI-293A細(xì)胞在第2天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，A549/DDP細(xì)胞在第3天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期；
　?、贏d-hIL-24能抑制A549/DDP細(xì)胞生長(zhǎng)，作用細(xì)胞48h后其

3、抑制率為27.0％，DDP組抑制率為19.37%，聯(lián)合組抑制率為42.93%，聯(lián)合組使細(xì)胞抑制率從DDP組的19.37%上升到42.93%，從而使得A549/DDP細(xì)胞生長(zhǎng)抑制逆轉(zhuǎn)2.22倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　?、哿魇郊?xì)胞儀檢測(cè)Ad-hIL-24、DDP及Ad-hIL-24+DDP各組作用A549/DDP細(xì)胞48h后凋亡率分別為27.90%、16.40%、39.61%與陰性對(duì)照組比較有差異，其中聯(lián)合組較單獨(dú)組引起細(xì)胞凋亡更多，

4、逆轉(zhuǎn)作用更明顯；
　?、苡玫鞍踪|(zhì)印跡法測(cè)各組蛋白含量變化，Ad-hIL-24+DDP組與其他各組相比P-Akt和P-gp蛋白表達(dá)含量下降，各組中Akt蛋白表達(dá)含量不變。
　　結(jié)論:
　　①Ad-hIL-24能抑制A549/DDP細(xì)胞的體外生長(zhǎng)，聯(lián)合DDP后細(xì)胞抑制率高于單獨(dú)組使得細(xì)胞生長(zhǎng)抑制逆轉(zhuǎn)2.22倍，其可通過誘導(dǎo)A549/DDP細(xì)胞凋亡來發(fā)揮作用。
　?、贏d-hIL-24逆轉(zhuǎn)A549/DDP耐藥，通過抑制