慢性飲酒大鼠肺組織CTGF和TIMP-1的表達及意義.pdf

1、目的:隨著生活水平的提高、生活節(jié)奏的加快與工作壓力的加大,酒精消費量與飲酒人數(shù)都在逐年上升,慢性飲酒已成為嚴重影響人類健康的重要因素之一。WHO2006年的一份報告顯示過度飲酒與60多種疾病有關,飲酒可導致妊娠女性和新生兒疾病、癌癥、神經(jīng)精神疾病、心血管疾病、肝硬化、肺損傷、意外損傷等,酒精與人體健康的關系已成研究的熱點。酒精對人類的幾乎每個器官系統(tǒng)都有潛在的生物學效應,其中酒精對肺組織也有一定影響,其代謝特點及揮發(fā)性使得氣道上皮處于高

2、乙醇濃度下,長期處于這種環(huán)境下可以造成氣道上皮損傷和肺組織重構,而導致酒精相關性肺病。目前對酒精能否引起肺纖維化的研究很少,本研究旨在通過建立慢性飲酒大鼠模型,觀察肺組織中谷胱甘肽、羥脯氨酸含量及結締組織生長因子(CTGF)、基質金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)的表達,以探討酒精與肺纖維化之間的關系及可能的機制,進一步尋找肺纖維化的可能致病因素,使人們對酒精的危害有進一步了解。
　　 方法:根據(jù)Lieber-DeCarli酒

3、精液體飼料配方配制含酒精和不含酒精而熱卡相同的液體飼料。健康雄性SPF級Sprague-Dawley大鼠20只,體重160-200g,隨機分成對照組(C組)10只,每日給定量無酒精液體飼料單籠喂養(yǎng)；酒精組(A組)10只,每日給定量酒精液體飼料單籠喂養(yǎng),不再提供飲水。各組動物均于8周后麻醉處死,開胸分離完整氣管和肺組織,右肺通過蘇木素-伊紅染色觀察肺組織的形態(tài)變化,通過Masson染色觀察肺間質中膠原沉積的情況,用比色法計算大鼠肺組織中的

4、谷胱甘肽和羥脯氨酸的含量、通過Elisa檢測肺組織中結締組織生長因子、基質金屬蛋白酶抑制劑-1的表達。應用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,計數(shù)資料以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用t檢驗,選擇P<0.05(雙側)為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1、一般狀態(tài):實驗前大鼠一般狀況良好,正常進食、排球狀干爽便,皮毛順滑有光澤。實驗后各組大鼠攝食無顯著差別,酒精組的大鼠體重增長緩慢,毛色枯黃,有脫毛、行動遲緩,排不

5、成形稀便,易激惹。
　　 2、HE染色結果顯示:對照組肺泡結構清晰,肺泡壁及間質內無炎性細胞浸潤。酒精組可見不同程度的肺泡及肺泡間隔炎性細胞浸潤,部分肺泡壁破壞、塌陷,間隔增寬,膠原沉積。Masson染色結果示:酒精組較對照組在肺泡間隔中膠原纖維沉積增多。
　　 3、比色法測定結果顯示:與對照組比較,酒精組肺組織谷胱甘肽(GSH)含量減少；酒精組肺組織羥脯氨酸(HYP)含量增加,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

6、>　　 4、Elisa實驗結果顯示:與對照組比較,酒精組肺組織結締組織生長因子(CTGF)、基質金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)表達量升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論:本實驗證明用Lieber-DeCarli酒精液體飼料可以建立慢性飲酒大鼠動物模型,慢性飲酒可以引起大鼠肺組織谷胱甘肽減少,使肺組織的氧化抗氧化系統(tǒng)失衡,發(fā)生氧化應激反應；氧化應激產(chǎn)物一方面促進肺成纖維細胞釋放大量促纖因子CTGF,另一方