廣西巴馬縣人群外周血白細(xì)胞端粒DNA長度的研究.pdf

1、目的：探討廣西巴馬縣人群外周血白細(xì)胞端粒DNA長度隨年齡變化的規(guī)律，分析該地區(qū)人群外周血白細(xì)胞端粒DNA長度隨年齡增加而縮短的速度是否比非長壽地區(qū)人群緩慢，比較該地區(qū)人群外周血白細(xì)胞端粒DNA長度是否比非長壽地區(qū)人群外周血白細(xì)胞端粒DNA長度長，從而探索巴馬長壽現(xiàn)象是否與端粒有關(guān)。 方法：1、建立端粒DNA長度的檢測方法：地高辛探針標(biāo)記的Southernblot方法。2、收集49例廣西巴馬縣健康人群(實(shí)驗(yàn)組)外周血樣和51例廣西

2、非長壽地區(qū)健康人群(對(duì)照組)外周血樣，將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組按年齡分為四組，分別為：青年組(<35歲)，中年組(≥35歲，<64歲)，老年組(≥64歲，<85)，長壽組(≥85)。運(yùn)用地高辛探針標(biāo)記的Southernblot方法測量人群外周血白細(xì)胞端粒DNA限制性酶切片斷(TRF)長度。3、使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。 結(jié)果： 1、優(yōu)化地高辛探針標(biāo)記的Southernblot方法，確定樣品DNA最佳上樣量為

3、1.5μg，最佳酶切時(shí)間為2h。測量對(duì)照樣品端粒DNA長度，結(jié)果分別為3.9Kb、10.2Kb。 2、對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組人群外周血白細(xì)胞端粒DNA長度與年齡作相關(guān)與回歸分析，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組年齡與外周血白細(xì)胞端粒DNA長度線性關(guān)系良好，兩組的相關(guān)系數(shù)分別為-0.944與-0.942，回歸方程分別為Y=11.888-0.044X、Y=11.141-0.045X(X為年齡，Y為端粒長度)，比較兩個(gè)方程的回歸系數(shù)，t=0.32(P

4、>0.05)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、以年齡為協(xié)變量，對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組外周血白細(xì)胞端粒DNA長度作協(xié)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組端粒DNA長度不同，且實(shí)驗(yàn)組端粒DNA長度較長。 4、對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組內(nèi)部各個(gè)年齡組外周血白細(xì)胞端粒DNA長度做方差分析，結(jié)果顯示兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組內(nèi)部各年齡組之間的端粒DNA長度均有差異，年齡越大的組別端粒DNA長度越短。

5、 5、對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間不同年齡組外周血白細(xì)胞端粒DNA長度做t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示除青年組的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，中年組、老年組、長壽組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組人群端粒DNA長度在中年組、老年組、長壽組均比對(duì)照組人群端粒DNA長度長。 6、對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組內(nèi)部不同性別端粒DNA長度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示兩組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，尚不能認(rèn)為不同性別人群的外周血白細(xì)胞端粒DNA長度有差異。