核因子-κB P65、IL-8及MMP-9在SIAI孕婦不同組織中的表達及臨床意義的探索.pdf

1、早產是常見的妊娠并發(fā)癥，約占整個妊娠的5％-15％。早產兒發(fā)病率和病死率明顯高于正常足月產新生兒，約占圍產兒死亡率的2/3，因此一直受到產科界的關注。研究發(fā)現早產與宮內感染關系密切，將與宮內感染相關的早產稱為感染性早產。根據報道早產孕婦中有約58％-88％被證實有組織學絨毛膜羊膜炎改變。但臨床上多數孕婦呈現亞臨床表現，癥狀不典型，給臨床診斷帶來困難。以往感染性早產診斷主要依靠羊水細菌培養(yǎng)陽性或胎盤胎膜組織學檢查發(fā)現絨毛膜羊膜炎，但上述方

2、法前者所需時間較長，后者需要產后才能確診，不能達到早期診斷早期治療的目的。近年來有研究者通過檢測孕婦外周血中CRP(CRP)、補體及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA、IgS等預測感染性早產，但臨床應用中發(fā)現這些指標均存在敏感性和特異性較低的問題。因此從早產發(fā)病機制著手，尋找早期反映羊膜腔內感染敏感性和特異性高的指標成為目前研究的熱點。 NF-κ B是近年來發(fā)現的一種核轉錄因子，啟動并調節(jié)機體炎癥和免疫反應、凋亡及細胞的增值分化等

3、相關基因的轉錄。參與早產及分娩發(fā)動過程的許多炎性因子如IL-8等的分泌，均受NF-κB的調控。也有報道MMP-9的基因上游調節(jié)元件中含有NF-κB結合位點，與NF-κB結合后啟動基因的轉錄<'[2]>。 白介素-8(IL-8)是一種重要的炎性細胞因子，參與機體的炎性反應，被認為是介導羊膜腔內感染的炎性介質，能客觀反映羊膜腔內感染的情況，IL-8的表達明顯增高提示宮內感染的存在。根據大量研究推測IL-8可能通過刺激多核白細胞的侵潤

4、繼而促進MMPs的分泌。 MMPs是一組鋅依賴的蛋白水解酶，主要參與細胞外基質的代謝。MMP-9是MMPs家族中的一員，可特異性地降解Ⅳ型膠原。Ⅳ型膠原主要存在于絨毛膜和羊膜的基底層。研究發(fā)現MMP-9活性的升高與胎膜中膠原的降解密切相關，MMP-9參與正常足月分娩胎膜破裂的發(fā)生。進一步研究發(fā)現伴有羊膜腔內感染的胎膜早破患者，其體內MMP-9的表達明顯高于正常妊娠。但MMP-9與感染的關系并未得到闡明。 NF-κB是IL

5、-8、MMP-9的基因表達促進因子，IL-8參與促進MMP-9的分泌，MMP-9表達異常增高導致胎膜破裂。NF-κB、IL-8、MMP-9在亞臨床絨毛膜羊膜炎的發(fā)生中是否存在相關性?它們在孕婦血清、胎盤胎膜中的表達如何，又與胎兒臍血中的表達存在什么關系，目前尚未見報道。因此，本實驗選擇了早產這一常見的妊娠并發(fā)癥作為研究對象，從胎盤胎膜入手，通過不同的實驗方法觀察NF-κB與IL-8及MMP-9的表達變化及組織形態(tài)學的改變；比較母外周血及

6、臍血中NF-κB、IL-8與MMP-9水平。從而探討NF-κB、IL-8與MMP-9的含量與亞臨床絨毛膜羊膜炎的關系及其在發(fā)病機制中的作用，為早期預測感染性早產及為臨床上早期制定治療方案提供理論依據。 第一章NF-κB P65蛋白預測亞臨床絨毛膜羊膜炎價值的研究 目的：研究NF-κB P65在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達變化，探討其在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中的作用，評價其預測亞臨床絨毛膜羊膜炎

7、及亞臨床絨毛膜羊膜炎治療效果的臨床價值。 方法：選擇早產臨產組36例，先兆早產組14例，足月妊娠自然臨產組37例，足月妊娠同期對照組38例，早產同期對照組18例。通過HE染色、免疫組織化學、免疫細胞化學、Western Blotting、RT-PCR五種實驗方法，觀察NF-κB P65在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達變化。 結論： 1．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕母血白細胞中NF-κB P65表達增

8、高，可能作為預測亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標之一，且有可能作為評價亞臨床絨毛膜羊膜炎治療效果實驗室指標之一； 2．亞臨床絨毛膜羊膜炎胎兒臍血中NF-κB P65表達增高，可能作為預測早產亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標之一，且有可能作為評價治療亞臨床絨毛膜羊膜炎預后實驗室指標之一； 3．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦胎盤胎膜組織中NF-κB P65蛋白表達增高，提示NF-κB P65在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中起到重要的作用。

9、 第二章IL-8預測亞臨床絨毛膜羊膜炎價值的研究 目的：研究IL-8在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達水平的變化，探討其在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中的作用，評價其早期預測感染性早產的價值。 方法：選擇早產臨產組36例，先兆早產組14例，足月妊娠自然臨產組37例，足月妊娠同期對照組38例，早產同期對照組18例。通過ELISA、HE染色、免疫組織化學3種實驗方法，觀察IL-8蛋白在早產亞臨床絨毛膜

10、羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達變化。 結論： 1．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血清中IL-8表達增高，可能作為預測早產亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標之一，且有可能作為評價早產亞臨床絨毛膜羊膜炎治療效果實驗室指標之一； 2．亞臨床絨毛膜羊膜炎胎兒臍血中IL-8表達增高，可能作為預測亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標之一，且有可能作為評價治療亞臨床絨毛膜羊膜炎預后實驗室指標之一； 3．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦胎

11、盤胎膜組織中IL-8表達增高，提示IL-8因子參與亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病。 4．亞臨床絨毛膜羊膜炎胎兒臍血中IL-8蛋白表達增高，可能作為預測新生兒感染性疾病的實驗室指標之一，有助于早期協(xié)助診斷新生兒感染性疾病并及時指導臨床治療；并且可能作為新生兒感染性疾病療效及愈后評價的實驗室指標。 第三章MMP-9預測亞臨床絨毛膜羊膜炎價值的研究 目的：研究MMP-9在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達水

12、平的變化，探討其在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中的作用，評價其早期預測感染性早產的價值。 方法：選擇早產臨產組36例，先兆早產組14例，足月妊娠自然臨產組37例，足月妊娠同期對照組38例，早產同期對照組18例。通過ELISA、HE染色、免疫組織化學3種實驗方法，觀察MMP-9蛋白在早產亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達變化。 結論： 1．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血清中MMP-9蛋白表達增高，可能