整合素連接酶在慢性移植腎病中的作用與機制.pdf

1、目的：探討整合素連接酶(ILK)在慢性移植腎病(CAN)的作用與機制。方法：實驗組腎移植受體為近交系雄性Lewis大鼠40只，供體為近交系雄性Fisher大鼠40只，依照標準的慢性移植腎病大鼠模型要求行左腎原位移植，術后7天切除右腎。對照組分別為單純右腎切除的Lewis大鼠及Fisher大鼠各25只。分別于4周、8周、12周、16周及24周時收獲大鼠，同時做腎功能、腎組織學檢測，應用免疫組織化學與Western-blot方法測定腎組織中

2、ILK的表達，RT-PCR方法檢測ILKmRNA表達，同時分別運用免疫組化、Western-blot方法檢測ILK作用有關的信號傳導通路磷酸化蛋白激酶B(pAKT)、磷酸化糖原合成酶3β(pGSK-3β)及其效應因子磷酸化肌球蛋白輕鏈(pMLC)、基質金屬蛋白酶9(MMP-9)、血管內皮生長因子(VEGF)的表達。結果：移植組大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平16周時顯著增高，24周時更為顯著。移植4周時腎間質可見單個核細胞浸潤，12周時可見

3、血管平滑肌細胞的移行與增殖，24周時可見輕度腎間質纖維化、血管硬化及管腔狹窄。RT-PCR結果顯示，移植組各時相ILKmRNA表達水平顯著高于同時相F344對照組或LEW對照組，且隨著移植時間的延長，ILKmRAN表達水平有逐步增高趨勢。移植組各時相ILK、pAKT、pMLC、VEGF表達水平顯著高于同時相F344或LEW對照組，pGSK-3β顯著低于同時相Fisher或Lewis對照組，且隨著移植時間的延長這一趨勢更為顯著；移植4W組

4、MMP-9表達水平顯著增高，16W、24W是則顯著低于同時相對照組。Spearman等級相關分析結果顯示，腎移植大鼠在ILK表達水平與腎間質單個核細胞浸潤、腎間質纖維化、腎小球硬化及血管硬化程度呈顯著正相關，與pAKT、pMLC、VEGF、MMP-9表達水平呈顯著正相關，與pGSK-3β表達呈負相關。結論：ILK在慢性移植腎病病理變化中發(fā)揮重要作用，其機制可能是通過作用于AKT、GSK傳導通路，進而導致移植腎組織腎間質單個核細胞浸潤、血