gax基因過表達(dá)對自體移植靜脈平滑肌細(xì)胞增殖的抑制作用.pdf

1、目的:隨著靜脈移植在治療冠心病和周圍動脈缺血性疾病中的廣泛應(yīng)用,內(nèi)膜增殖所引起的移植靜脈狹窄成為影響術(shù)后遠(yuǎn)期效果的主要因素.Gax基因是近年來備受重視的與血管形成和生長有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子,該實(shí)驗通過觀察gax基因過表達(dá)對移植靜脈血管平滑肌細(xì)胞(vascular smoothmuscle cells,VSMC)表型變化的影響,探索一種防治移植靜脈再狹窄的治療方法.結(jié)論:實(shí)驗表明移植靜脈重塑早期出現(xiàn)gax表達(dá)上調(diào)或過表達(dá)PCNA又稱周期蛋白,其

2、量可客觀反映VSMCs增殖數(shù)量及分布.VSMC是構(gòu)成血管壁的主要細(xì)胞之一,是決定血管活性與構(gòu)型的重要因素,細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化(phenotype switch)是其重要的特征.血管內(nèi)膜過度增生(intimal hyperplasia,IH)是以VSMC過度增殖病理改變?yōu)榛A(chǔ),而VSMC的增殖又取決于其表型轉(zhuǎn)化狀態(tài).即IH與VSMC合成表型密切相關(guān),gax基因通過細(xì)胞凋亡途徑發(fā)揮作用可誘導(dǎo)VSMC凋亡.在gax基因過表達(dá)狀態(tài)下顯著誘導(dǎo)增殖型VS

3、MC凋亡,從而使收縮表型VSMC相對增多,在一定程度上抑制了增殖型VSMC向內(nèi)的遷移并相對減少細(xì)胞外基質(zhì)的合成.該實(shí)驗證明,1.通過RT-PCR和蛋白印跡雜交檢測到移植靜脈中g(shù)axmRNA和蛋白表達(dá)均升高1倍,提示以重組腺相關(guān)病毒為載體,介導(dǎo)gax基因轉(zhuǎn)染移植靜脈組織獲得成功,并能表達(dá).2.通過電鏡及PCNA檢測觀察到實(shí)驗組血管組織中合成表型狀態(tài)的VSMC顯著減少,而收縮表型的VSMC相對升高表明移植靜脈內(nèi)以腺相關(guān)病毒為載體轉(zhuǎn)染gax基

4、因后,gax蛋白的過表達(dá)可調(diào)節(jié)VSMC的轉(zhuǎn)化狀態(tài),可抑制VSMC自收縮型向合成型轉(zhuǎn)化.3.以gax基因為靶點(diǎn),可能在靜脈移植后IH治療中發(fā)揮重要作用.4.應(yīng)用gax基因可抑制增殖型VSMCs并相對減少細(xì)胞外基質(zhì)的合成,故可在IH中發(fā)揮抑制作用.其在血管組織受損致IH的病理演變的早期過程中表達(dá)水平出現(xiàn)一過性下調(diào)趨勢,一周后又逐漸恢復(fù)至正常,它的低表達(dá)水平狀態(tài)是引起細(xì)胞凋亡相對不足的因素之一.因此,在移植靜脈重塑早期促進(jìn)gax基因過表達(dá)是防