姜黃素對血管平滑肌細胞增殖抑制作用及機理探討.pdf

1、實驗目的:觀察姜黃素對血管平滑肌細胞增殖的抑制作用;探討其作用機理。
　　 方法:(1)體內實驗:將實驗大鼠分為4組:假手術組(N組)、模型組(M組)、高劑量藥物作用組(H組)、低劑量藥物作用組(L組)。行P53,Fas組化檢測;Bcl-2、Bax免疫印跡檢測;TUNEL染色。結果用麥克奧迪圖象分析系統(tǒng)分析,計算每張片子的平均光密度,藥物用組分別與模型組進行比較,行單因素方差分析,計算P值。(2)體外實驗:將VSMC隨機分為五組

2、,分別為空白組、模型組(AngⅡ10-7mol/L)和模型+姜黃素1、2、3組(姜黃素劑量為10、20、40、80μmol/L),各組VSMC用相應的細胞培養(yǎng)液孵育48小時,分別應用MTT檢測生長率,用流式細胞術檢測VSMC的細胞周期構成比,用TUNEL檢測凋亡率。實驗數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標準差(-X±S)表示,各組之間的數(shù)值比較采用樣本均數(shù)方差分析進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果:(1)體內實驗:高劑量藥物作用組和假手術組Fas、P53

3、的表達低于模型組,P＜0.05;低劑量藥物作用組與模型組相比無顯著性差異,P＞0.05。高、低劑量藥物作用組和假手術組的Bcl-2和TUNEL的表達低于模型組,P＜0.05。高、低劑量藥物作用組和假手術組Bax表達高于模型組,P＜0.05。(2)姜黃素作用后的VSMC較模型組的VSMC都有增殖減少,并與姜黃素的濃度呈反比;姜黃素作朋后的VSMCG0/G1期構成比較模型組的VSMC升高,與姜黃素的濃度呈正比,S期、G2/M期構成比較模型組