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文檔簡介
1、目的:探討人參環(huán)氧炔醇(panaxyd61)對大鼠主動脈平滑肌細胞(Rat Aortic Smooth Muscle Cells,RASMCs)增殖和遷移的抑制作用及其機制。 方法:大鼠胸主動脈平滑肌細胞原代培養(yǎng)(植塊培養(yǎng)法),取3~8代細胞進行實驗。實驗分組如下:①對照組(含0.1%DMSO培養(yǎng)液);②10%胎牛血清(Fetal Bovine Serum,F(xiàn)BS)組;③1、3、9μmol·L<'-1>panaxydol組(pa
2、naxydol孵育30min后加入10%FBS)。采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法、細胞刮片法和比色法分別觀察RASMCs的增殖、遷移和羥脯氨酸含量,RT-PCR觀察線粒體轉(zhuǎn)錄因子1 mRNA(mitochondrial transcription factor 1,mtTF1mRNA)的表達。 結(jié)果:MTT結(jié)果顯示10%FBS組與對照組相比,RASMCs吸光值增加39.9%(P<0.01);1、3、91amol·L<'-1>pa
3、naxydol組取消10%FBS組升高的吸光值,細胞增殖的抑制率分別為11.7%(P<0.05~0.01)、21.9%(P<0.01)、30.0%(P<0.01),表明panaxydol對血清誘導的RASMCs增殖具有濃度依賴性的抑制作用。細胞刮片法顯示10%FBS組明顯增加細胞遷移距離,與對照組相比有極顯著性差異(p<0.01);1、3、9gmol·L<'-1> panaxydol組減少細胞遷移距離,與10%FBS組相比有顯著性差異,
4、遷移的抑制率分別為4.4%(P<0.05~0.01)、12.5%(P<0.01)、18.5%(P<0.01),提示panaxydol能明顯抑制血清誘導的RASMCs遷移。比色法檢測顯示經(jīng)不同濃度panaxydol作用后,培養(yǎng)上清液A值明顯減少,提示羥脯氨酸含量明顯減少,與10%FBS組相比有明顯差異,1、3、9gmol·L<'-1>panaxydol組羥脯氨酸含量抑制率分別為2.8%(P<0.05~0.01)、11.8%(P<0.01)
5、、27.9%(P<0.01)。此外,采用RT-PCR法分析顯示1、3、9gmol·L<'-1> panaxydol孵育24h,顯著降低RASMCs 10%FBS誘導的mtTFl mRNA表達上調(diào),提示panaxydol抑制mtTFl mRNA表達可能是其抑制RASMCs增殖、遷移和基質(zhì)合成的機制之一。 結(jié)論:panaxydol具有抗RASMCs增殖、遷移和基質(zhì)合成的作用,該作用與抑制mtTF1 mRNA表達有關(guān)。本研究為開發(fā)防治
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