兔踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶重建術(shù)對(duì)韌帶本體感覺(jué)的影響.pdf

1、一、目的：
　　 對(duì)比觀察兔踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶斷裂解剖重建術(shù)前后機(jī)械感受器小體的數(shù)量及S1脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)的NT-3的變化，以探討兔踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶斷裂解剖重建術(shù)對(duì)韌帶本體感覺(jué)影響。
　　 二、方法：
　　 1、選取21只成年新西蘭大白兔，隨機(jī)選擇3只，耳緣靜脈空氣栓塞處死后隨機(jī)取一側(cè)踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶和同側(cè)S1背根神經(jīng)節(jié)，作為空白對(duì)照組。再隨機(jī)選取9只，均在韌帶中部隨機(jī)切斷一側(cè)踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶，行Brostr(o)m

2、解剖重建術(shù)后縫合切口，作為實(shí)驗(yàn)組；余下9只，均在韌帶中部隨機(jī)切斷一側(cè)踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶，曠置切斷的韌帶后，作為對(duì)照組。兔俯臥位固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，麻醉滿意后，消毒、鋪無(wú)菌巾。在實(shí)驗(yàn)兔后肢作一長(zhǎng)約3cm踝外側(cè)弧形切口，找到腓骨肌腱，使其脫位后，可找到連接外踝與跟骨前部的踝外側(cè)韌帶，尖刀切斷外側(cè)韌帶；實(shí)驗(yàn)組使用3-0絲線行端端縫合；實(shí)驗(yàn)對(duì)照組則將切斷的韌帶復(fù)位后，不縫合；復(fù)位腓骨肌腱，妥善固定后，縫合切口，并用無(wú)菌敷料包扎。術(shù)后不進(jìn)行踝關(guān)節(jié)的固定，

3、讓其自由活動(dòng)，普通喂養(yǎng)。每天肌注青霉素20萬(wàn)U/d，連續(xù)3d，7天后拆線。
　　 2、分別于術(shù)后2周，6周和12周末耳緣靜脈空氣栓塞各處死3只實(shí)驗(yàn)兔，取踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶，將其放入生理鹽水沖洗后，按改良O'Connor and Gonzales(1979)氯化金染色法染色后，常規(guī)脫水、透明、石蠟包埋后，制備出5μm厚的連續(xù)切片，每隔200μm取一張片。光鏡下對(duì)機(jī)械感受器小體(Pacini小體、Ruffini小體、Golgi腱器官)進(jìn)

4、行識(shí)別和計(jì)數(shù)。
　　 3、沿坐骨神經(jīng)逆行找到S1背根神經(jīng)節(jié)，切取后其用生理鹽水沖洗后，放入4％多聚甲醛內(nèi)固定，再行脫水、透明、石蠟包埋。將各組背根神經(jīng)節(jié)組織塊連續(xù)性橫切，切片厚度為5μm，每個(gè)神經(jīng)節(jié)隨機(jī)取切片6張。用NT-3兔抗血清(滴度為1∶100)在同一條件下對(duì)各組切片行ABC免疫組織化學(xué)染色。光鏡下觀察和定量。
　　 4、所有數(shù)據(jù)均采用SPSS16.0軟件統(tǒng)計(jì)包進(jìn)行分析，連續(xù)性正態(tài)分布的資料以((-x)±s)表示，

5、多組均數(shù)間比較采用One-Way Anova法，多組均數(shù)間的兩兩比較采用LCD法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 三、結(jié)果：
　　 1、在韌帶機(jī)械感受器小體數(shù)計(jì)數(shù)方面，三組之間的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。兩兩比較示：空白對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組各時(shí)段均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，空白對(duì)照組多于實(shí)驗(yàn)組和實(shí)驗(yàn)對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組各時(shí)段之間與對(duì)照組一樣，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；實(shí)驗(yàn)組各時(shí)段與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組各時(shí)段均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，實(shí)驗(yàn)組多于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。

6、　　 2、在S1脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元NT-3表達(dá)方面，三組之間的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩兩比較示：空白對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組各時(shí)段均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，實(shí)驗(yàn)組和實(shí)驗(yàn)對(duì)照組各時(shí)段多于空白對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組各時(shí)段之間與對(duì)照組一樣，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；實(shí)驗(yàn)組各時(shí)段與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組各時(shí)段之間的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 四、結(jié)論：
　　 1、兔踝關(guān)節(jié)外側(cè)韌帶斷裂后，不管手術(shù)與否，均會(huì)出現(xiàn)本體感覺(jué)功能下降；Brostr(o)m解剖重建術(shù)能最大限度的保留本