蛋氨酸腦啡肽對(duì)樹突狀細(xì)胞表型及功能成熟的影響.pdf

1、前言
　　 1975年Hughes等從豬腦提取液中分離出具有內(nèi)源性嗎啡樣活性物質(zhì)蛋氨酸腦啡肽(Methionine Enkephalin,MENK)。蛋氨酸腦啡肽的早期研究主要集中在作為鎮(zhèn)痛劑和神經(jīng)遞質(zhì)方面,但隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)其受體在免疫系統(tǒng)以及某些腫瘤組織和正常組織細(xì)胞均有分布。MENK通過與免疫細(xì)胞上受體結(jié)合發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。樹突狀細(xì)胞(Dendritic cell,DC)是目前所知的機(jī)體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞,

2、參與機(jī)體多種自身免疫性疾病、免疫缺陷病、腫瘤及一些炎癥反應(yīng)的病理過程,在機(jī)體的抗感染免疫及腫瘤免疫應(yīng)答過程中起著極其重要的作用,是基礎(chǔ)與臨床研究的熱點(diǎn)。未成熟DC在機(jī)體的外周組織中捕獲和加工抗原,然后開始向淋巴器官轉(zhuǎn)移,并漸進(jìn)式成熟,與此同時(shí)DC表面重要的功能分子,如:MHC-Ⅱ、CD40和CD80(CD86)的表達(dá)增加。由于DC在免疫調(diào)節(jié)中的重要作用,使人們?cè)絹碓蕉嗟仃P(guān)注DC的研究與應(yīng)用,特別是在抗腫瘤方面的應(yīng)用。因此,研究DC已經(jīng)成

3、為一個(gè)熱點(diǎn)領(lǐng)域。鑒于MENK在免疫系統(tǒng)中的顯著調(diào)節(jié)作用,所以研究MENK對(duì)DC的作用對(duì)于闡明MENK對(duì)免疫系統(tǒng)作用機(jī)理是十分必的,國內(nèi)外未見報(bào)道。本研究就MENK對(duì)小鼠髓系DC2.4細(xì)胞株成熟過程中表型及功能的變化的影響作用進(jìn)行探討。
　　 方法
　　 采用本教研室保存并傳代的小鼠髓系DC2.4細(xì)胞株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞,應(yīng)用掃描電鏡技術(shù)、酸性磷酸酶活性檢測、流式細(xì)胞儀檢測技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等檢測DC表型和功能的各

4、種指標(biāo)。
　　 結(jié)果
　　 1、MENK處理的DC表面可見很長的突起；而未作處理的DC(即RPMI1640組)的突起很短甚至沒有突起。
　　 2、蛋氨酸腦啡肽組和LPS組的樹突狀細(xì)胞的酸性磷酸酶活性均低于RPMI1640組(P<0.05)。
　　 3、MENK和LPS類似,能夠上調(diào)樹突狀細(xì)胞表面MHC-Ⅱ、CD86、CD40分子的表達(dá)。
　　 4、ELISA結(jié)果顯示DC在未做任何處理時(shí)(即RPMI

5、 1640組)IL-12分泌的量少,MENK和LPS處理的DC能夠分泌高水平的IL-12(P<0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1、適宜濃度的蛋氨酸腦啡肽顯著促進(jìn)DC形態(tài)學(xué)的成熟。
　　 2、適宜濃度的蛋氨酸腦啡肽作用使DC細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶活性下降,表明DC吞噬抗原能力下降,遞呈能力增加,趨向成熟。
　　 3、適宜濃度的蛋氨酸腦啡肽顯著增加DC的MHC-Ⅱ、CD40和CD86分子的表達(dá),刺激DC發(fā)育成熟。