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1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人粒細胞集落刺激因子對HL60細胞的作用及其對阿糖胞苷毒性作用影響的研究姓名:王(钅厷)申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):兒內(nèi)科(小兒血液)指導(dǎo)教師:孫立榮20050528英文摘要STUDYoNTHEEFFECTSoFHUMANRECoMBINANTGRANULOCYTECLoNYSTUMILATINGFACToRoNHL60CELLANDSENSITIVITYoFCYTARABINEABSTRACTobjectivesT
2、oinvestigatetheeffectsofhumanrecombinantgranulocyte—clonystumimatingfactor(rhuG—CSF)onHL一60cellandeffectsonthesensitivityofcytarabineMethodsHL60cellwasculturedindifferentconcentrationofrhuGCSF(partone),thechangeswereobse
3、rvedbycellmorphology,includingWright’S、acridineorange(AO)andethidiumbromide(EB)staining;MTTassay;nitrobluetetrazoliurn(NBT);expressionofCDBThen(parttwo)HL一60cellwasculturedwithcytarabinewithorwithoutrhuG—CSF,morphology(W
4、ri曲t’SandAO/EBstaining)、MTTassaywereusedtoobservetheeffectsResultsHL60cellinthecontrolgrouphasnochangeAfterbeingculturedwithdifferentconcentrationsofrhuG—CSF48hours,themorphologychangescouldbeclearlyobserved:thecellunder
5、wentdeformation,decreasingvolume,bubblingThemembranesofthecellandthebubblewereintegralIfthecellwasstainedbyWright’S,thenuclearmembranesweresplitted,thepurplishredchromatinswereconcentratedanddividedintopieces,approachedt
6、onuclearmembranes,gatheredtotheedgeandformedstandardapoptosisbodiesDifferencescouldbeobservedwhentheODvalueoftheexperimentalgroupscomparingwiththecontrolgroupinMTTassay(p005),somegroupsevenmadesignificantdifferences;(pO0
7、1)theODvalueofcontrolgroupwashigherthantheexperimentalgroups,andwiththeincreasingoftheconcentrationsofrhuG—CSF,theODvaluesdecreasedthereweredifferencesbetweentheexperimentalgroupstooWhenweobservedthecellapoptosisbyAO/EBs
8、taining,wegetaoppositetrend,withtheincreasingoftheconcentrmionsofrhuG—CSFtheapoptosispercentageincreasedComparedvvimcontrolgroupthereweresignificantdifferencesbytheexperimentalgroups(p001)thereweredifferencesevensignific
9、antdiffemcesbetweentheexperimentalgroupsWhilewhenwestudiedtheODvalueinNBTassayandtheexpressionpercentageofCDl3,wefoundnodifferencesInparttwo,thecellhadthesamechangesinmorphologyasinthepartoneThelowtohighsequenceofODvalue
10、inMTTassaywas:rhuG—CSFAra—C,Arac,rhuG—CSF,CON,thedifferencesamongthegroupsweresignificant(pO01)ThelowtohighsequenceofapoptosispercentageinAO/EBstainingwas:CON,rhuGCSF,Ara—C,AracrhuGCSF,thedifferencesamongthegroupsweresig
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