微小殘留病在兒童急性白血病意義和價值探討.pdf

1、目的和意義: 急性白血病(Acute Leukemia,AL)是兒童期最常見的惡性血液腫瘤疾病,兒童急性淋巴細(xì)胞白血病(Acute lymphoblastic Leukemia，ALL)的治愈率接近80％。目前普遍認(rèn)為微小殘留病(Minimal residue disease,MRD)與AL復(fù)發(fā)有關(guān)，流式細(xì)胞技術(shù)(Flow cytometry，F(xiàn)CM)對兒童ALL MRD監(jiān)測，可以作為預(yù)測復(fù)發(fā)、指導(dǎo)臨床治療、判斷預(yù)后的有力因素。

2、骨髓病理免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry，IHC)能夠彌補(bǔ)骨髓穿刺術(shù)的不足，其敏感性高于骨髓涂片。有研究提示CD20、CD79a及Bcl-2在初發(fā)兒童AL骨髓病理中表達(dá)增高。本課題主要分為兩個部分：1.通過FCM進(jìn)行MRD監(jiān)測，探討兒童ALL MRD水平的動態(tài)變化、并與臨床特點(diǎn)與療效的相關(guān)性；2. 兒童AL骨髓病理Bcl-2、CD20、CD79a的表達(dá)與發(fā)病和預(yù)后的關(guān)系。 方法: 1.符合本課題要求

3、B-ALL病例共37例，所采集的骨髓標(biāo)本用Ficoll 分離單個核細(xì)胞，應(yīng)用CD38、CD45、CD56、CD65、CD22、CD33、CD13 等單抗通過FCM對表面抗原進(jìn)行單色的直接標(biāo)記檢測及進(jìn)一步的四色抗體組合檢測，用Cell Quest 軟件進(jìn)行分析，獲得MRD的數(shù)值。了解B-ALL患兒緩解后MRD值與患兒臨床特點(diǎn)之間的關(guān)系及與治療的相關(guān)性。通過MRD值與糖皮質(zhì)激素窗口誘導(dǎo)反應(yīng)在評估患兒預(yù)后，來進(jìn)一步證實(shí)兒童B-ALL窗口治療反

4、應(yīng)作為早期臨床療效和預(yù)后評估的手段之一。 2. 33例兒童急性白血?。ˋL）及10例對照組作骨髓病理檢查，并檢測Bcl-2、CD20、CD79a的表達(dá)情況；了解其在初發(fā)和緩解期白血病骨髓病理中的表達(dá)；了解FCM無MRD合適標(biāo)記/“干抽”患兒中是否有意義。 結(jié)果: 1. MRD值與患兒的臨床特點(diǎn)（年齡、起病時外周血白細(xì)胞計數(shù)、染色體情況）之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 2. 糖皮質(zhì)激素窗口治療反應(yīng)中PG

5、R患兒CR 率明顯高于PPR患兒(90.63％和80％)，而復(fù)發(fā)率低(6.25％和20％)，但未獲統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。其與MRD值在預(yù)測患兒臨床療效中達(dá)到基本一致，提示激素窗口治療反應(yīng)能夠作為臨床評估ALL治療反應(yīng)的最早參考指標(biāo)之一。 3. 33例有MRD合適標(biāo)記的B-ALL患兒在CR后進(jìn)行MRD監(jiān)測，MRD＜0.01％和MRD≥0.01％兩組患兒在臨床緩解與復(fù)發(fā)中有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 4. 誘導(dǎo)緩解后

6、2例MRD早期增高，通過加強(qiáng)化療強(qiáng)度持續(xù)CR。1例MRD晚期增高，化療敏感性減弱，臨床復(fù)發(fā)。 5. Bcl-2在初發(fā)ALL和AML骨髓病理表達(dá)顯著增高，與緩解組、對照組有顯著差異（P＜0.05)。初發(fā)ALL和AML兩組間Bcl-2表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)意義(83.3％和66.6％)。緩解后骨髓病理Bcl-2陽性表達(dá)在判斷臨床CR/復(fù)發(fā)有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)，提示其治療前后表達(dá)變化，可協(xié)助臨床判斷療效。 6.骨髓病理CD20、

7、CD79a表達(dá)提示：在初發(fā)B-ALL比AML明顯增高，有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。緩解后B-ALL CD20、CD79a表達(dá)下降，與初發(fā)時期存在統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05)。緩解期持續(xù)陽性表達(dá)與臨床CR/復(fù)發(fā)無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05)。 7. FCM無MRD合適標(biāo)記的初發(fā)B-ALL，2例骨髓病理Bcl-2持續(xù)陽性均表現(xiàn)為臨床復(fù)發(fā)。 結(jié)論: 1．FCM對B-ALL患兒MRD監(jiān)測能夠有效提示患兒臨床治療效果、指