羅紅霉素對(duì)哮喘大鼠氣道重塑中成肌纖維細(xì)胞、TGF-β1和IFN-γ的影響.pdf

1、目的：1.探討成肌纖維細(xì)胞(myofibroblast,MF)在哮喘氣道重塑中的作用.2.探討轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 1(transforruing growth factor-beta 1,TGF-β 1)和γ干擾素(interferon-γ,IFN-γ)在哮喘氣道重塑中的作用.3.觀察羅紅霉素對(duì)哮喘氣道重塑的影響,并與地塞米松作對(duì)照. 方法：SD大鼠40只,隨機(jī)分為哮喘組(A組)、生理鹽水對(duì)照組(C組)、地塞米松治療組(D組)和羅紅

2、霉素治療組(R組),每組10只.利用卵白蛋白(ovalbumin,OVA)/Al(OH)<,3>致敏與OVA霧化吸入激發(fā)建立大鼠哮喘模型.免疫組化(immunohistochemistry,IHC)測(cè)定肺組織中支氣管上皮下成肌纖維細(xì)胞的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表達(dá)含量,并使用圖象分析技術(shù)進(jìn)行積分光密度(integral optical density,IOD)定量分析測(cè)定.光鏡觀察肺組

3、織病理結(jié)構(gòu)變化,圖像分析軟件分析,并測(cè)定肺內(nèi)支氣管總管壁厚度、內(nèi)管壁厚度、平滑肌層厚度等指標(biāo).ELISA法測(cè)定支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中TGF-β 1矛口IFN-γ的濃度. 結(jié)果：1.光鏡:哮喘組支氣管和血管周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn),氣道上皮多處斷裂,氣道腔內(nèi)可見(jiàn)粘液栓等,地塞米松治療組和羅紅霉素治療組上述表現(xiàn)減輕,生理鹽水對(duì)照組無(wú)上述表現(xiàn).2.免疫組化和圖像分析結(jié)果:哮喘組

4、與生理鹽水對(duì)照組相比,總管壁厚度、內(nèi)管壁厚度、平滑肌層厚度顯著增厚(P<0.01).地塞米松治療組和羅紅霉素治療組中的內(nèi)管壁厚度、平滑肌層厚度與哮喘組相比,均顯著變薄(P<0.01).羅紅霉素治療組的總管壁厚度、內(nèi)管壁厚度、平滑肌層厚度與地塞米松治療組相比無(wú)顯著差異(P>0.05).定量分析測(cè)定的IOD值顯示哮喘組支氣管上皮下成肌纖維細(xì)胞α-SMA表達(dá)含量較生理鹽水對(duì)照組顯著增加(P<0.01),地塞米松治療組和羅紅霉素治療組表達(dá)含量較

5、哮喘組均減少(P<0.05),羅紅霉素治療組表達(dá)含量與地塞米松治療組相比無(wú)顯著差別(P>0.05).3.ELISA法測(cè)定結(jié)果:哮喘組BALF中TGF-β 1濃度較生理鹽水對(duì)照組顯著升高(P<0.01),地塞米松治療組和羅紅霉素治療組均較哮喘組濃度降低(P<0.01),但仍高于生理鹽水對(duì)照組(P<0.05),羅紅霉素治療組與地塞米松治療組相比無(wú)顯著差別(P>0.05).哮喘組BALF中IFN-γ濃度較生理鹽水對(duì)照組顯著降低(P<0.01)

6、,地塞米松治療組和羅紅霉素治療組均較哮喘組濃度高(P<0.01),但仍低于生理鹽水對(duì)照組(P<0.05),羅紅霉素治療組比地塞米松治療組濃度降低(P<0.01).4.相關(guān)分析結(jié)果:支氣管上皮下成肌纖維細(xì)胞α-SMA表達(dá)含量(用10D值表示)和內(nèi)管壁厚度呈正相關(guān)(r=0.913,P<0.01,n=40),和平滑肌層厚度也呈正相關(guān)(r=0.626,P<0.01,n=40);BALF中TGF-β1濃度和支氣管上皮下成肌纖維細(xì)胞α-SMA表達(dá)含

7、量(用10D值表示)呈正相關(guān)(r=0.785,P<0.01,n=39),BALF中IFN-γ濃度和支氣管上皮下α-SMA表達(dá)含量(用10D值表示)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.708,P<0.01,n=39). 結(jié)論：1.成肌纖維細(xì)胞在氣道重塑形成中起重要作用.2.TGF-β1可誘導(dǎo)成肌纖維細(xì)胞的表達(dá),促進(jìn)哮喘氣道重塑,IFN-γ可抑制成肌纖維細(xì)胞的表達(dá),抑制了哮喘氣道重塑.3.羅紅霉素和地塞米松一樣均可能通過(guò)減少TGF-β1,增加IFN