膠原誘導性關節(jié)炎大鼠模型建立及其滑膜IL-33的表達.pdf

1、目的：優(yōu)化造模條件，建立可重復的高發(fā)病率膠原誘導性關節(jié)炎(CIA)大鼠模型，并探討膠原給藥劑量以及性別因素對造模成功率的影響。檢測IL-33在CIA大鼠以及正常大鼠滑膜中的表達情況并進行比較。 方法：以雞II型膠原蛋白(CII)與弗氏不完全佐劑(IFA)制成乳劑，皮內(nèi)注射近交系Wistar大鼠誘導CIA。采用隨機分組設計，考察400μg、300μg、200μg、Opg4個膠原蛋白給藥劑量水平，以及性別因素對發(fā)病率的影響，并每周測

2、量足爪容積，進行關節(jié)炎評分，每兩周ELISA檢測血清抗CII抗體、TNF-α濃度至初次免疫后第6周，進行X線攝片并處死大鼠行病理HE染色，以檢查關節(jié)病變與骨質(zhì)破壞情況。選取造模成功的CIA大鼠，以半定量RT-PCR與免疫組化染色方法測定其關節(jié)滑膜IL-33的mRNA以及蛋白表達情況，并與正常對照組做比較。 結果：發(fā)病大鼠可見體重下降、足掌增厚、踝關節(jié)腫脹，并有數(shù)量不等的跖、趾關節(jié)紅腫，且行走不便，急性期受累足不能負重。平均臨床評

3、分達6.3±1.8，其血清抗CII抗體與TNF-α濃度均升高，初次免疫后第6周時X線及病理形態(tài)呈現(xiàn)慢性滑膜炎表現(xiàn)，可見明顯骨質(zhì)侵蝕。統(tǒng)計分析顯示發(fā)病率隨膠原給藥劑量增加而上升，400μg組造模成功率達100％。性別對造模成功率無顯著影響。各種CII劑量在造模過程中均未發(fā)生動物死亡。CIA大鼠關節(jié)滑膜IL-33 mRNA水平與蛋白表達水平均較正常對照組增高。免疫組化染色顯示CIA大鼠滑膜中IL-33的主要來源有血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞以及

4、滑膜襯里細胞，在正常對照組大鼠滑膜的上述細胞中也可見陽性反應，但較病變滑膜淺染。 結論： 1.成功建立發(fā)病穩(wěn)定的大鼠模型，其臨床表現(xiàn)顯著，免疫學及病理學上具有典型不可逆慢性滑膜炎癥特征，并顯示出明顯的骨質(zhì)侵蝕。 2.提高膠原蛋白給藥劑量能夠提高造模成功率，400μg的劑量發(fā)病率可達100％。性別對發(fā)病率無明顯影響。 3.IL-33在關節(jié)滑膜的內(nèi)皮細胞、滑膜襯里細胞以及成纖維細胞中呈組成性低表達。