硫酸鈣復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽修復(fù)骨缺損的研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　第一部分：骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽的合成及其體外成骨誘導(dǎo)活性研究
　　目的:研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽P24的合成及其體外成骨誘導(dǎo)活性。
　　方法:FMOC/tBu固相合成法合成骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)核心區(qū)的功能多肽P24。配備含10μg/ml和30μg/ml P24的兩種SD大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)完全培養(yǎng)液,與SD大鼠MSC完全培養(yǎng)液及SD大鼠MSC成骨誘導(dǎo)完全培養(yǎng)液分組培

2、養(yǎng)SD大鼠MSC。培養(yǎng)2周和3周時(shí)分別檢測(cè)各組堿性磷酸酶(ALP)活性。
　　結(jié)果:FMOC/tBu固相合成法成功合成了BMP-2的功能多肽P24。培養(yǎng)2周和3周時(shí),含30μg/ml P24的完全培養(yǎng)液組ALP活性明顯高于成骨誘導(dǎo)完全培養(yǎng)液組。
　　結(jié)論:通過(guò)FMOC/tBu固相合成法合成的BMP-2的功能多肽P24具有體外成骨誘導(dǎo)活性,含30μg/ml P24的MSC完全培養(yǎng)液成骨誘導(dǎo)能力最強(qiáng)。
　　第二部分：硫酸鈣

3、復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2多肽修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：研究硫酸鈣（CS）復(fù)合BMP-2功能多肽P24修復(fù)骨缺損的能力。
　　方法：新西蘭大白兔60只，隨機(jī)分為5組，即空白組（A組）、CS組（B組），50μgP24/2gCS組（C組），100μgP24/2gCS組（D組），200μgP24/2gCS組（E組）。在兔股骨髁造成直徑7mm，深10mm的腔隙性骨缺損，按照分組植入材料。術(shù)后第4、8、12周分組處死兔子，分別進(jìn)行大

4、體標(biāo)本、X線、Micro-CT以及組織學(xué)觀察，比較各組材料修復(fù)骨缺損的能力。
　　結(jié)果：大體標(biāo)本觀察：術(shù)后12周，A組骨缺損仍然明顯，B組骨缺損區(qū)大部分修復(fù)，C、D、E組骨缺損完全修復(fù)。X線觀察：對(duì)術(shù)后12周各組標(biāo)本骨缺損修復(fù)情況進(jìn)行X線評(píng)級(jí)，C、D、E組明顯優(yōu)于B組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Micro-CT檢測(cè)：術(shù)后12周骨計(jì)量學(xué)指標(biāo)顯示，C、D、E組骨密度（BMD）、骨體積分?jǐn)?shù)（BV/TV）、骨小梁數(shù)量（Tb.N）

5、及結(jié)構(gòu)模型指數(shù)（SMI）的測(cè)量結(jié)果均優(yōu)于B組，D、E組各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于C組，其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。組織學(xué)觀察：術(shù)后12周，A組骨缺損明顯，基本由纖維結(jié)締組織填充；B、C、D、E組材料完全降解，骨缺損區(qū)域由新生骨填充，其中C、D、E組骨小梁密度高于B組，D、E組優(yōu)于C組。
　　結(jié)論：P24功能多肽在動(dòng)物體內(nèi)具有較強(qiáng)的促進(jìn)骨修復(fù)的能力；復(fù)合P24功能多肽可提高硫酸鈣修復(fù)骨缺損的能力；按100μgP24/2gCS比例復(fù)合