致血流感染的腸球菌的實驗研究.pdf

1、目的：研究引起血流感染的腸球菌的分布與耐藥性、毒力基因以及生物膜的形成情況,了解耐萬古霉素的腸球菌的耐藥基因和分子流行病學特點。
　　方法：采用藥敏分析軟件WHONET對2008年~2012年分離自解放軍總醫(yī)院患者血流感染中腸球菌進行回顧性分析。將保存的菌種復活,用Vitek-2全自動細菌鑒定儀進行鑒定,用紙片法檢測腸球菌對抗菌藥物氨芐西林,環(huán)丙沙星,紅霉素,利奈唑胺的敏感性,用瓊脂稀釋法進行高濃度氨基糖苷類抗生素的敏感性試驗,用

2、E-test法進行萬古霉素和替考拉寧的敏感性試驗。應用聚合酶鏈式反應(PCR)對腸球菌的毒力基因和耐萬古霉素基因進行檢測,用微孔板法進行生物膜形成試驗。用脈沖場凝膠電泳和多位點序列分型對耐萬古霉素的腸球菌菌株進行分子流行病學分析。
　　結果：本研究共收集到211株腸球菌,包括161株屎腸球菌與50株糞腸球菌。其抗菌藥物敏感性試驗結果如下:屎腸球菌和糞腸球菌對氨芐西林的耐藥率為93.2％和22%,對環(huán)丙沙星的耐藥率為93.7%和44

3、%,對紅霉素的耐藥率為87.0%和72%。耐高濃度慶大霉素的屎腸球菌和糞腸球菌分別占68.3%和40%,耐高濃度鏈霉素屎腸球菌和糞腸球菌分別占15.5%和30%。屎腸球菌對萬古霉素的耐藥率是5.6%,對替考拉寧的耐藥率為1.9%,對利奈唑胺全敏感。糞腸球菌對萬古霉素,替考拉寧,利奈唑胺皆敏感。28株糞腸球菌的毒力基因asa1, esp,cylA,gelE的檢出率分別為75%,75%,64.3%,85.7%,未檢測到hyl基因;54株屎腸

4、球菌對esp和hyl的檢出率分別為72%和31.5%,未檢測到其他三種基因。糞腸球菌和屎腸球菌形成生物膜陽性菌株的比率分別為85.7%和63.0%。耐萬古霉素的腸球菌共9株,均攜帶有vanA基因,未檢測到vanB基因。脈沖場凝膠電泳分型的結果顯示,耐萬古霉素的腸球菌各菌株具有不同的分子表型,9株VRE可被分為9個克隆。多位點序列分型的結果顯示,9株耐萬古霉素腸球菌株分別屬于ST78(7/9)、ST192(1/9)和ST804(1/9)型