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1、目的:第一部分:(1)探討急性心肌梗死(AMI)患者血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、血管形成素-1(Ang-1)及可溶性酪氨酸激酶受體Tie-2(sTie-2)的濃度變化;(2)根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,體外應(yīng)用重組VEGF、Ang-1蛋白及重組人可溶性Tie-2/Fc嵌合體蛋白(Tie-2/Fc),觀察其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞存活及管狀形成的影響及可能的信號(hào)傳導(dǎo)途徑,推測(cè)AMI急性期血管新生的狀況;(3)構(gòu)建血清sTie-2檢測(cè)用蛋白質(zhì)光學(xué)芯片,探討將光
2、學(xué)蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)法(OPC-IE)用于檢測(cè)sTie-2濃度的可行性。第二部分:(1)應(yīng)用攜帶抗CD146抗體的免疫磁珠分離計(jì)數(shù)AMI及不穩(wěn)定心絞痛(UA)患者外周血中循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞(CECs);(2)探討CECs與疾病及炎性相關(guān)因子C反應(yīng)蛋白質(zhì)(CRP)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)及腫瘤壞死因子α(TNFα)的關(guān)系,探討其產(chǎn)生的可能機(jī)制;(3)根據(jù)第一和第二部分的結(jié)果,探討AMI時(shí)血清sTie-2濃度升高與內(nèi)皮細(xì)胞損傷的關(guān)系?! 〗Y(jié)論:
3、(1)AMI急性期血清sTie-2濃度升高并隨病程發(fā)展而變化;(2)Ang-1能協(xié)同VEGF促進(jìn)ECs管狀形成;(3)Tie-2/Fc抑制管狀形成,提示AMI患者急性期血管新生減低;(4)高濃度Tie-2/Fc抑制管狀形成可能是通過(guò)抑制Tie-2-Akt-NO信號(hào)傳導(dǎo)途徑實(shí)現(xiàn);(5)sTie-2可能源于缺血壞死心肌部位的血管內(nèi)皮細(xì)胞及損傷的內(nèi)皮細(xì)胞;(6)相對(duì)于ELISA法,OPC-IE法具有節(jié)省時(shí)間、操作簡(jiǎn)單和無(wú)需對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行標(biāo)記等
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