脊髓沖擊傷動物模型的建立及凋亡相關基因表達的初步研究.pdf

1、目的: ①研制一種小型沖擊波發(fā)生裝置，模擬爆炸沖擊波的致傷作用。②建立實驗條件下的兔不同程度脊髓沖擊傷動物模型。③探討兔脊髓沖擊傷后脊髓組織中Bcl-2、Bax蛋白早期表達的變化規(guī)律，為進一步闡明脊髓沖擊傷的發(fā)生機制和指導臨床治療提供實驗依據(jù)。
　　 方法: ①根據(jù)氣體動力學原理，采用破膜技術及傳感器檢測技術，研制出一種由儲氣設備、發(fā)射系統(tǒng)、沖擊波測試分析系統(tǒng)所組成的小型沖擊波發(fā)生裝置。檢測氣源壓力分別為400kPa、500kP

2、a、600kPa、700kPa、800kPa時該裝置所產(chǎn)生的沖擊波的超壓峰值、持續(xù)時間及傳播速度，不同的氣源壓力分別重復5次。②將24只新西蘭大白兔隨機分為4組，每組6只。A組：對照組；B組：氣源壓力為0.4MPa損傷組；C組：氣源壓力為0.6MPa損傷組；D組：氣源壓力為0.8MPa損傷組。采用小型沖擊波發(fā)生裝置，將兔T9和T10全椎板切除顯露硬膜，按分組預設氣源壓力實施單次沖擊波致傷，對照組僅行椎板全切除，不設施沖擊波致傷。48h后

3、觀察各組兔后肢運動、感覺功能變化以及脊髓病理學變化，綜合評價脊髓損傷程度。③設定小型沖擊波發(fā)生裝置的氣源壓力為0.6MPa，單次沖擊波致兔脊髓中度損傷，致傷后在不同時間點(4～72h)，光鏡觀察脊髓組織形態(tài)學變化，免疫組織化學方法觀察Bcl-2和Bax蛋白在脊髓組織的表達情況。
　　 結果: ①小型沖擊波發(fā)生裝置能模擬產(chǎn)生沖擊波，其檢測到的波形類似于Friedlander波形，即典型空氣沖擊波波形。隨著氣源壓力的增大，沖擊波超壓

4、峰值及速度同時增大，正壓持續(xù)時間基本不變。各組數(shù)據(jù)重復性好。②各組隨著氣源壓力的增大，兔后肢運動、感覺功能損害明顯加重。兔脊髓沖擊傷后48小時，各組動物運動及感覺功能評分差異顯著。傷后48h發(fā)現(xiàn)受損節(jié)段脊髓水腫、變性壞死，脊髓灰質的病理損害嚴重。③兔脊髓中度沖擊傷后4～72h，光鏡下觀察脊髓組織細胞腫脹、壞死改變增多，脊髓灰質的病理損害嚴重。沖擊傷后脊髓灰、白質均有Bcl-2和Bax蛋白表達，但在時間分布上呈不均一性。Bcl-2在傷后1

5、2h呈陽性表達，表達高峰持續(xù)在傷后24h～48h，而Bax在傷后4h呈陽性表達，表達高峰也持續(xù)在傷后24h～48h，但表達程度始終強于Bcl-2。
　　 結論：①小型沖擊波發(fā)生裝置能模擬產(chǎn)生沖擊波，且性能穩(wěn)定、安全，可重復性強。②小型沖擊波發(fā)生裝置建立的動物脊髓沖擊傷模型安全、穩(wěn)定、有效，能較好的模擬輕、中、重不同程度脊髓沖擊傷，適用于實驗條件下的脊髓沖擊傷研究。③兔脊髓沖擊傷后損傷早期局部促進凋亡的因子表達占主導優(yōu)勢，而保護性