趨化因子CXCL9及其受體CXCR3在肝纖維化損傷中的基因表達變化研究.pdf

1、肝臟纖維化是指肝細胞發(fā)生炎癥刺激及壞死時，肝臟中的膠原蛋白、糖蛋白和蛋白多糖等細胞外基質的增生與降解失去平衡，導致肝臟內纖維結締組織異常沉積的病理過程。輕者稱為纖維化，重者經過反復持續(xù)的炎癥和壞死影響，纖維不斷增生，伴有肝小葉結構改建、假小葉和結節(jié)形成，即發(fā)展為肝硬化。肝纖維化是病毒性肝炎等各種慢性肝病導致肝癌的重要途徑。現階段最有效的治療方法僅限于在肝硬化末期的肝移植。因此確定肝纖維化的產生和發(fā)展機制，以及如何逆轉纖維化是當前研究的重

2、要內容。
　　趨化因子是一類具有細胞因子功能的趨化分子，在許多組織中起著調節(jié)炎癥反應的作用，在急慢性肝病中，趨化因子一般通過調節(jié)免疫細胞（單核細胞、T細胞）在肝臟組織的滲入，以間接的方式參與損傷反應。近年來的研究發(fā)現，趨化因子也可以直接作用于肝細胞和星狀細胞等肝臟宿主細胞，參與炎癥和纖維化損傷應答；同時，針對基因敲除動物的研究也表明，單獨的趨化因子和趨化因子受體也能對肝臟的毒性損傷與炎癥反應產生影響。
　　本文通過建立肝纖維

3、化損傷和恢復的實驗動物模型，研究肝臟組織階段性的病理與血清學指標的變化規(guī)律，檢驗模型質量，并研究CXCL9及其受體 CXCR3在肝臟纖維化損傷與恢復中的表達變化。最后嘗試對CXCR3-/-小鼠建立部分肝臟切除模型，為進一步研究做好鋪墊。
　　誘導肝纖維化模型，采用腹腔注射四氯化碳的方法進行。大鼠按照2ml/kg劑量，腹腔注射四氯化碳與橄欖油1:1的混合溶劑，每周注射2次。2周后改為1ml/kg劑量，直至造模成功；對照組僅注射溶劑。

4、在預先設置的若干時間點，部分實驗組動物停止注射四氯化碳，令其進入自恢復階段。同時處死動物，采集血樣與肝臟組織標本，用于血清學與組織學分析、定量PCR檢測。
　　隨著四氯化碳反復多次注射，肝臟纖維化損傷程度也隨之加深，越來越多的細胞外基質沉積，在造模的第12周，肝組織纖維化比例達到40％。在肝臟造模的自恢復階段初期，細胞增殖明顯，以期通過降解細胞外基質來重塑肝組織結構，隨后肝臟膠原纖維的比例也慢慢降低至8%。在肝臟纖維化造模過程中，