甲強龍預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷的最佳用藥時間探討.pdf

1、在某些導(dǎo)致脊髓缺血因素去除,脊髓恢復(fù)血供后,卻出現(xiàn)了明顯的功能障礙,甚至出現(xiàn)不可逆性脊髓神經(jīng)元遲發(fā)性死亡,這種現(xiàn)象稱為脊髓缺血再灌注損傷。脊髓缺血再灌注損傷是臨床既常見又很難避免的棘手問題(如嚴(yán)重的脊髓型頸椎病,嚴(yán)重的黃韌帶、后縱韌帶骨化造成的胸椎管狹窄等手術(shù)減壓后的脊髓缺血再灌注損傷)。導(dǎo)致患者術(shù)后神經(jīng)癥狀加重,出現(xiàn)不全癱甚至全癱,給患者生理及心理帶來極大的痛苦,給家庭和社會帶來巨大負(fù)擔(dān)。熱休克蛋白27(Heat Shock Prot

2、ein27,HSP27)是一種作用廣泛的保護(hù)性蛋白,能提高細(xì)胞對不利環(huán)境的適應(yīng)性反應(yīng)。甲基強的松龍(Methylprednisolone,MP)是一種具有抗炎、抗氧化、減少細(xì)胞內(nèi)鈣離子的畜積、減少興奮性氨基酸釋放等作用的合成糖皮質(zhì)激素,其已經(jīng)在臨床應(yīng)用于預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷。有學(xué)者證實:在大鼠急性脊髓損傷模型中,甲基強的松龍可上調(diào)HSP27的表達(dá)。但預(yù)防應(yīng)用MP對缺血再灌注損傷局部脊髓組織中HSP27表達(dá)的影響尚未見報導(dǎo)。
　　

3、目的:制作大鼠脊髓缺血再灌注損傷動物模型,并在大鼠脊髓缺血再灌注損傷前30min、1h、3h三個不同的時間點,預(yù)防性應(yīng)用治療量(30mg/kg)的甲基強的松龍,觀察不同時間預(yù)防應(yīng)用甲基強的松龍后,脊髓缺血再灌注損傷局部HSP27表達(dá)的變化。來探討甲基強的松龍預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷的最佳用藥時間,并闡明其可能的機(jī)制。
　　方法:實驗中總計使用SD大鼠75只,隨機(jī)分為A、B、C、D、E組,每組15只。A組為假手術(shù)組,僅暴露腹主動脈,而

4、不做其它處理;B組為模型對照組;C組、D組、E組為三個實驗組。B、C、D、E組均通過夾閉腹主動脈造成脊髓缺血再灌注損傷,C、D、E組分別于損傷前30min、1h、3h尾靜脈注射30mg/kg甲基強的松龍,B組于損傷前30min尾靜脈注射與治療組等量的生理鹽水,作為對照治療。損傷后3h取脊髓標(biāo)本。行HE染色,觀察損傷局部神經(jīng)元胞體、胞核、核仁的形態(tài);神經(jīng)元的極性;和尼氏體的染色情況,了解損傷后組織的病理變化;以免疫組化染色檢測HSP27表

5、達(dá),觀察HSP27表達(dá)的部位和強弱。使用計算機(jī)圖像分析的方法測量HSP27染色陽性物質(zhì)的吸光度A,A反應(yīng)染色強度,代表HSP27相對含量。數(shù)據(jù)結(jié)果應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行處理。
　　結(jié)果:HE染色可見,實驗組B神經(jīng)元胞體萎縮,胞核、核仁、尼氏體均顯示不清,極性消失。實驗組C胞體萎縮較組B明顯減輕,可以觀察到胞核和核仁,極性存在,尼氏體顯示欠均勻。實驗組D胞體萎縮較重,個別神經(jīng)元內(nèi)無法分辨胞核、核仁,極性不明顯,尼氏體染色

6、不均勻。實驗組E與實驗組B未見明顯差別。五個實驗組的HSP27染色陽性物質(zhì)平均吸光度值A(chǔ)((?)±s×400)分別為:63.76±3.02、100.32±4.13、132.05±5.03、121.92±4.68、102.16±5.96。試驗組C、實驗組D HSP27表達(dá)均較模型組增強(P<0.05),且試驗組C、試驗D組間差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),試驗組E和實驗組B HSP27表達(dá)差別不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究發(fā)

7、現(xiàn),在脊髓缺血再灌注損傷前特定時間點預(yù)防使用甲基強的松龍,能上調(diào)缺血再灌注損傷局部脊髓組織中HSP27的表達(dá),且在HSP27表達(dá)增強的同時,伴隨著神經(jīng)細(xì)胞病理改變的減輕。這提示,甲基強的松龍預(yù)處理有減輕脊髓缺血再灌注損傷的作用,促使HSP27表達(dá)的上調(diào)可能是甲基強的松龍在脊髓缺血再灌注損傷中起保護(hù)作用的機(jī)制之一。同時,于再灌注損傷前30min、1b、3h三個不同的時間點采用甲基強的松龍預(yù)處理,其減輕脊髓損傷病理改變和上調(diào)HSP27表達(dá)的