規(guī)?；B(yǎng)鴨場(chǎng)雛鴨致病性大腸桿菌的分離、鑒定和耐藥性研究.pdf

1、從1999年以來(lái)自四川、重慶等13個(gè)不同地區(qū)的規(guī)?；B(yǎng)鴨場(chǎng)具有典型大腸桿菌病臨床癥狀和病理變化的5-35日齡雛鴨分離出272株大腸桿菌，經(jīng)對(duì)雛鴨的人工感染實(shí)驗(yàn)表明有很強(qiáng)的致病性，應(yīng)用微量平板凝集試驗(yàn)共鑒定出213株分離菌的O抗原血清型，分屬于29個(gè)血清型，以O(shè)76、O78、O92、O93、O149、O142為主要優(yōu)勢(shì)血清型，占總分離菌株的41.89％。O51、O59和O79血清型在我國(guó)禽類(lèi)中還未見(jiàn)報(bào)道過(guò)。不同地區(qū)的致病性大腸桿菌的血清型

2、有很大差異，其中綿陽(yáng)地區(qū)最復(fù)雜，共11種血清型，其次是廣漢，有8種。 對(duì)其中113株進(jìn)行33種抗生素敏感性試驗(yàn)結(jié)果表明，分離菌存在廣泛的耐藥性，以多重耐藥性為主，最多耐藥21種，以13耐、15耐、¨耐、7耐、9耐、12耐為主，共占53.0％。最為敏感的藥物是頭孢類(lèi)藥物、阿米卡星、妥布霉素、氨曲南、壯觀霉素、奈替米星、亞胺配能、慶大霉素等，耐藥率在20％以?xún)?nèi)；而氨芐青霉素、四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、萘啶酸、利福平等均不敏感，耐藥率均在80

3、％以上。并且耐藥率從1999年到2005年逐年上升，其中變化較大的是諾氟沙星(41.2％→60.2％)、哌拉西林(51％→80％)和頭孢呋新(6.8％→20％)。 挑選了18株耐環(huán)丙沙星、氧氟沙星和恩諾沙星的氟喹諾酮類(lèi)藥物的菌株，多重PCR擴(kuò)增其耐藥基因gyrAQRDR、parCQRDR和marOR，均擴(kuò)增出特異性帶，分別是205bp、462bp、409bp。對(duì)gyrAQRDR區(qū)限制性?xún)?nèi)切酶HinfⅠ酶切分析，有15株的83位S

4、er位點(diǎn)的改變使細(xì)菌對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物產(chǎn)生耐藥。對(duì)parCQRDR區(qū)進(jìn)行SSCP分析，表明parCQRDR區(qū)的突變促使細(xì)菌的耐藥程度增加。然后篩選兩株對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物高耐、同時(shí)耐多種抗菌藥物的菌株，對(duì)其marOR區(qū)測(cè)序，與GenBank公布的ATCC25922marOR基因序列作比較，發(fā)現(xiàn)氨基酸差異，分別是Arg27→Leu(1525g→t)、Trp83→Leu(1693g→t)、Gly103→Asp(1752g→a)和Tyr137→His