B淋巴細胞及白細胞介素-12在OLP中的表達.pdf

1、口腔扁平苔蘚(oral lichen planus,OLP),是口腔黏膜病中最常見的疾病之一,部分病損可發(fā)生惡變,世界衛(wèi)生組織(WHO)將其列為可能的癌前狀態(tài)。OLP的病因至今尚不十分清楚,目前認為是一種T細胞介導的免疫反應,其病程慢性遷延,治療已成為臨床上一個相當棘手的問題,目前還沒有治愈OLP的方法。其典型病理特征為上皮不全角化,基底層液化變性,固有層密集的淋巴細胞浸潤帶。OLP淋巴細胞浸潤帶中雖以T細胞為主,但也有少量的B淋巴細胞

2、,約6％[1]。CD20是B淋巴細胞特有的表面標記,它出現(xiàn)于前B淋巴細胞,B淋巴細胞激活分化將導致CD20的高表達[2],B淋巴細胞分化至成熟的漿細胞時,CD20表達消失。單核細胞、靜息或活化的T細胞、裸細胞及非淋巴細胞均不表達CD20分子。IL-12是一種p35與p40結(jié)合成的異二聚體分子,在B淋巴細胞、單核細胞、角質(zhì)細胞以及DC中都有表達活性,其趨化作用主要由p40來完成。IL-12在Th1細胞介導的免疫反應和炎癥性疾病中發(fā)揮著重要

3、作用。
　　 目的:
　　 本實驗通過免疫組化技術(shù)及熒光實時定量PCR技術(shù)檢測正?？谇火つづcOLP中B淋巴細胞及IL-12的表達情況,以觀察B淋巴細胞及IL-12在兩種不同組織中的變化規(guī)律,探討其在口腔扁平苔蘚發(fā)生過程中的作用及意義,為臨床上治療口腔扁平苔蘚提供新的思路。
　　 方法:
　　 1.收集臨床及病理確診的口腔正常黏膜5例、OLP標本20例,將每個標本的連續(xù)切片分別進行HE染色、CD20及IL-

4、12p40免疫組化分析和陰性對照,根據(jù)免疫組化結(jié)果從蛋白水平觀察CD20、IL-12p40在不同組織中的表達情況。
　　 2.收集正?？谇徽衬そM織和臨床及病理確診的OLP各6例,應用PCR技術(shù)檢測標本中IL-12的表達,驗證引物設計合成物無誤后,進行熒光實時定量PCR,檢測IL-12p40 mRNA在兩組中的表達情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.CD20免疫組化結(jié)果顯示:在正常口腔黏膜中,CD20呈陰性表達。在OL

5、P組織中,CD20在固有層淋巴細胞浸潤帶中呈陽性表達,且遠離基底膜側(cè)。
　　 2.IL-12p40免疫組化結(jié)果顯示:在正?？谇徽衬ぶ?IL-12p40呈陽性表達,主要位于棘層及顆粒層細胞以及結(jié)締組織中,其染色略淺。在OLP組織中,IL-12p40呈強陽性表達,其表達范圍與正?？谇火つぶ械南嗨?但其染色較正常口腔黏膜染色要深。
　　 3.IL-12p40熒光實時定量PCR結(jié)果顯示:與正?？谇徽衬ど掀ぜ敖Y(jié)締組織相比,口腔扁平

6、苔癬上皮及結(jié)締組織中IL-12p40 mRNA的表達量增多,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 CD20在正?？谇徽衬そM沒有表達,而在OLP組織有表達。IL-12p40 mRNA及蛋白在正常口腔粘膜組的上皮細胞和結(jié)締組織中的表達分別低于其在OLP組織中的表達。提示B淋巴細胞在口腔扁平苔癬的發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮一定的作用--不僅可能與基底膜區(qū)IgG、IgM沉積有關(guān),還可能通過分泌IL-12來促進Th1