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文檔簡介
1、目的:探討重組人生長激素(rhGH)對不同生長激素受體(GHR)表達狀態(tài)的人結(jié)腸癌細胞的生長及其JAK2-STAT3信號通路影響。
方法:采用流式細胞術(shù)檢測人結(jié)腸癌細胞株的GHR表達狀態(tài),選擇GHR較高表達和較低表達的細胞株各一株進入實驗,多種劑量rhGH干預(yù)各分組,采用MTT法分析人結(jié)腸癌細胞的生長變化,采用流式細胞術(shù)檢測細胞增殖指數(shù)(PI)、細胞周期分析及凋亡變化,采用蛋白質(zhì)印跡法檢測JAK2-STAT3信號通路相關(guān)分子J
2、AK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3、VEGF、Bcl-xL、CyclinD1蛋白水平的變化,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測JAK2-STAT3信號通路相關(guān)分子GHR、JAK2、STAT3、VEGF、Bcl-xL、Cyclin D1核酸水平變化。
結(jié)果:HCT-8細胞株GHR表達率為59.6%,為較高表達GHR組,LOVO細胞株GHR表達率為3.5%,為較低表達GHR組。rhGH處理HCT-8細胞后,顯著促進細胞的生長
3、(P=0.0068<0.01),G2/M期比例明顯高于未處理組(P=0.0047<0.01),PI升高,凋亡率減低(P=0.0033<0.01),并上調(diào)pJAK2、pSTAT3、VEGF、CyclinD1、Bcl-xL蛋白表達(P=0.0422<0.05),上調(diào)靶基因GHR、JAK2、STAT3、VEGF的mRNA表達(P=0.0387<0.05),但CyclinD1和Bcl-xL的mRNA表達無明顯變化(P=0.0732>0.05);
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