結(jié)腸康對惡唑酮誘導(dǎo)小鼠貴瘍性結(jié)腸炎的治療作用.pdf

1、背景：潰瘍性結(jié)腸炎是腸道慢性炎癥性疾病，Th細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)異常為其重要特點(diǎn)，但其確切發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前還沒有治療潰瘍性結(jié)腸炎的特效藥物。
　　 目的：探討細(xì)胞因子在小鼠惡唑酮結(jié)腸炎中的表達(dá)和結(jié)腸康對惡唑酮誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用。
　　 方法：120只KM小鼠，隨機(jī)分為6組：①正常對照組(N組)；②惡唑酮結(jié)腸炎組(M組)；③低濃度結(jié)腸康(6.4g/kg)干預(yù)組(D組)；④中濃度結(jié)腸康(12.8g/kg)干預(yù)

2、組（Z組）；⑤高濃度結(jié)腸康(25.6g/kg)干預(yù)組(G組)；⑥柳氮磺胺吡啶干預(yù)組（SASP組）。用惡唑酮酒精溶液灌腸致敏，建立惡唑酮小鼠結(jié)腸炎模型，結(jié)腸康和SASP干預(yù)后處死各組小鼠。評價疾病活動指數(shù)(DAI)、大體損傷評分；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測結(jié)腸組織IL-1β、IL-4、IL-10和TNF-α的表達(dá)；免疫組織化學(xué)檢測iNOS，測定結(jié)腸黏膜髓過氧化物酶(MP0)活性和一氧化氮(NO)濃度。
　　 結(jié)果：
　

3、　 1、結(jié)腸康對結(jié)腸炎小鼠DAI和死亡率的影響
　　 模型組與正常組相比，DAI評分明顯增高，結(jié)腸康高劑量組和SASP組DAI評分與正常組無明顯區(qū)別，但顯著低于模型組。正常對照組小鼠全部存活，模型組小鼠死亡率63.16％，結(jié)腸康高劑量組死亡率29.41％、中劑量組41.18％、低劑量組43.75％，SASP組43.75％。
　　 2、結(jié)腸康對小鼠結(jié)腸炎的治療作用
　　 2.1對結(jié)腸大體損傷的影響
　　

4、模型組小鼠結(jié)腸充血、腸壁變薄、潰瘍面積較大和潰瘍個數(shù)較多，大體損傷評分較正常組明顯增高；與模型組比較，結(jié)腸康低、中、高劑量可劑量依賴性降低結(jié)腸大體損傷評分，且高劑量組與SASP組比較無顯著差異，提示結(jié)腸康可有效治療結(jié)腸炎，其療效與陽性對照藥柳氮磺胺吡啶相同。
　　 2.2對結(jié)腸病理損傷的影響
　　 病變腸組織HE染色結(jié)果表明，正常組小鼠結(jié)腸腺體排列整齊，結(jié)構(gòu)完整，間質(zhì)分布均勻；模型組可見組織明顯水腫、潰瘍及腺體排列較亂，

5、并形成淋巴濾泡，局部結(jié)腸上皮腺體層數(shù)較少或缺失，上皮增生伴輕、中度非典型增生、間質(zhì)充血及大量炎性細(xì)胞浸潤，以中性粒細(xì)胞為主。低、中劑量組也可見潰瘍，仍有較明顯的組織水腫和大量炎性細(xì)胞浸潤。高劑量組及柳氮磺胺吡啶(SASP)組潰瘍較少，并可見已愈合的潰瘍組織，充血和組織水腫明顯減輕，炎性細(xì)胞浸潤明顯減少。
　　 2.3對結(jié)腸MPO活性的影響
　　 模型組MPO活性(1.26±0.18)較正常對照組(0.55±0.16)顯著

6、增高；結(jié)腸康低、中、高劑量組和SASP組MPO活性較模型組顯著降低，且高劑量組(0.67±0.12)與SASP組(0.73±0.10)比較差異無顯著性，提示結(jié)腸康可有效降低結(jié)腸炎所致小鼠結(jié)腸MPO活性升高，其作用與陽性對照藥柳氮磺胺吡啶相同。
　　 2.4對結(jié)腸NO含量的影響
　　 模型組NO含量(3.57±0.94)較正常對照組(0.45±0.15)顯著增高；結(jié)腸康低、中、高劑量組和SASP組NO含量較模型組顯著降低，

7、且高劑量組(0.57±0.13)與SASP組(0.65±0.16)比較差異無顯著性，提示結(jié)腸康可有效降低結(jié)腸炎所致小鼠結(jié)腸NO活性升高，其作用與陽性對照藥柳氮磺胺吡啶相同。
　　 2.5對結(jié)腸黏膜iNOS表達(dá)的影響
　　 正常對照組小鼠結(jié)腸黏膜僅見少iNOS表達(dá)，模型組小鼠結(jié)腸黏膜iNOS表達(dá)(20.47±4.31)顯著高于正常對照組(3.55±1.06)，結(jié)腸康可顯著降低小鼠結(jié)腸黏膜iNOS的表達(dá)，且其高劑量有效降低結(jié)

8、腸炎所致小鼠結(jié)腸黏膜iNOS表達(dá)升高的作用(5.24±1.91)與陽性對照藥柳氮磺胺吡啶(4.13±0.95)相同。
　　 2.6對結(jié)腸粘膜中IL-4、IL-10、TNF-α和IL-iβ的影響
　　 模型組與正常組相比，IL-4(3785±1171→1343±446)的表達(dá)量明顯降低,IL-10(7539±4532→3608±2319)、TNF-α(20591±9061→45513±8554)和IL-1β(3820±33

9、6→6614±979)的表達(dá)顯著增高。高劑量結(jié)腸康(2985±126)和SASP(3083±514)可顯著改善IL-4表達(dá)量的降低；低、中、高劑量結(jié)腸康能劑量依賴性顯著降低結(jié)腸粘膜中IL-10、TNF-α和IL-1β含量，且其高劑量作用(8758±2134、26307±3538、3783±692)與陽性對照藥SASP(10372±1115、26446±2465、4169±505)無顯著差別，提示結(jié)腸康可有效治療結(jié)腸炎所致小鼠結(jié)腸黏膜損傷

10、，并能使其恢復(fù)到正常水平，其作用與陽性對照藥柳氮磺胺吡啶相同。
　　 結(jié)論；本研究結(jié)果表明，結(jié)腸康可明顯改善OXZ誘導(dǎo)UC小鼠癥狀、結(jié)腸病理形態(tài)，明顯減輕炎癥細(xì)胞浸潤，促進(jìn)腸道潰瘍愈合；也能明顯上調(diào)OXZ誘導(dǎo)UC小鼠的IL-4水平下降，抑制IL-1β、TNF-α、IL-10水平升高，提示其作用機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)Th1/Th2之間的平衡，促進(jìn)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)間的穩(wěn)定，改善機(jī)體的免疫功能，抑制腸黏膜的免疫損傷，控制腸道炎癥反應(yīng)，從而達(dá)到