小鼠胰管結(jié)扎對內(nèi)外分泌細胞功能的影響.pdf

1、研究目的：
　　 通過小鼠胰管的選擇性結(jié)扎，造成小鼠胰液局部引流障礙，形成胰腺炎表現(xiàn)，然后序貫性的觀察小鼠體重和血糖的改變，以及外分泌和內(nèi)分泌細胞的形態(tài)和功能變化，并通過刺激手段，來進一步研究小鼠內(nèi)分泌細胞，尤其是β細胞的功能變化，并為進一步開展相關(guān)實驗研究奠定基礎(chǔ)。
　　 研究方法：
　　 采用雄性8周齡的C57BL/6小鼠作為實驗研究動物，并隨機將48只小鼠分為胰管結(jié)扎手術(shù)組和假手術(shù)組，并在手術(shù)后1d、2d、

2、3d、5d、7d、10d、2w、4w、8w在兩組中分別取標(biāo)本觀察和比較胰腺的大體觀變化以及內(nèi)分泌和外分泌細胞的組織病理學(xué)變化，并針對內(nèi)分泌細胞，尤其是β細胞的生物學(xué)特性，進行一系列特殊抗體的免疫組化染色。另外，將部分術(shù)后8w的小鼠通過鏈尿霉素（STZ）的腹腔低劑量持續(xù)注射，化學(xué)性的毀壞部分β細胞，使小鼠血糖輕度升高，但低于糖尿病標(biāo)準(zhǔn)，同時喂以含有核苷酸類似物（BrdU）的飲水進行增生細胞的標(biāo)記，最后取標(biāo)本行相應(yīng)抗體染色觀察β細胞增生狀況

3、。所有圖片采用圖像分析軟件Image Pro Plus6.0處理，各數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果以mean±SD表示，并采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行各組數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)分析，P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 研究結(jié)果：
　　 小鼠的胰腺大致分為三部分，即胃部胰腺（胃葉）、十二指腸部胰腺（十二指腸葉）、脾部胰腺（脾葉）。胰管結(jié)扎組小鼠在術(shù)前體重為22.5±0.5g；術(shù)后第1天，體重降至最低值，數(shù)值為20.0±0.7g；術(shù)后第2天開始

4、逐漸升高，第10天基本恢復(fù)至術(shù)前體重水平，22.3±1.1g；此后仍逐漸升高，處死前（術(shù)后第8周）體重達26.4±0.6g。而假手術(shù)組中，有類似趨勢，但各階段均較手術(shù)組明顯為重（p<0.05）。胰管結(jié)扎組小鼠術(shù)前術(shù)后血糖無明顯變化（p>0.05），假手術(shù)組小鼠術(shù)前血糖與手術(shù)胰管結(jié)扎組無明顯差異，術(shù)后血糖和術(shù)前血糖未出現(xiàn)明顯變化（p>0.05）。手術(shù)后8周的小鼠，在STZ注射前、注射后5天測血糖，發(fā)現(xiàn)血糖有輕度的升高（p<0.05），但低

5、于糖尿病標(biāo)準(zhǔn)。外分泌腺組織病理學(xué)變化：術(shù)后1天：胰腺間質(zhì)水腫，小葉問的胰管擴張，腺泡腔輕度擴大；術(shù)后5天：明顯擴張的胰管和擴大的腺泡腔，部分結(jié)締組織增生，出現(xiàn)管樣組織；術(shù)后7天：外分泌腺明顯萎縮，腺泡細胞減少，腺泡腔極度擴張，胰管擴張進一步加重；術(shù)后4周：胰腺進一步萎縮，外分泌組織消失，代以脂肪組織，管樣組織仍然明顯可見較多的存在；術(shù)后8周：胰腺體積增大，但無外分泌組織，脂肪組織和纖維結(jié)締組織明顯，后者圍繞胰島和主管道；相應(yīng)對照組的胰腺