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1、動脈粥樣硬化(AS)發(fā)生涉及多因素、多環(huán)節(jié)。HDL在體內(nèi)可以被內(nèi)皮細胞、巨噬細胞和平滑肌細胞氧化修飾,體外可以被Cu2+、HClO等氧化修飾。HDL一旦被氧化修飾后,不僅喪失以上功能,而且具有明顯的細胞毒作用,從而促進AS的發(fā)生。本研究就是在國內(nèi)外包括本室研究的基礎(chǔ)上,探討天然高密度脂蛋白和氧化修飾高密度脂蛋白對內(nèi)皮細胞部分分泌功能的影響?! ∈紫确蛛x正常人血漿高密度脂蛋白,用Cu2+法在體外將其氧化修飾后,234nm光吸收值、相對電
2、泳遷移率(REM)和硫代巴比妥酸反應(yīng)物質(zhì)(TBARS)含量均顯著增加(p<0.01),表明HDL發(fā)生了氧化修飾。然后把不同質(zhì)量濃度(5mg/L,10mg/L,50mg/L)的氧化修飾高密度脂蛋白(OX-HDL)和人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)共同孵育24小時,用試劑盒測定細胞培養(yǎng)基中一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)含量,再用蛋白含量校正由于各孔細胞數(shù)目不一樣所帶來的誤差,以真實反映不同組之間的差別?! 榱吮容^HDL氧化
3、修飾前后對內(nèi)皮細胞分泌功能的影響,以PBS為空白對照,以50mg/L的HDL為正常對照,加入50mg/L的OX-HDL和內(nèi)皮細胞共同孵育24小時后,測定培養(yǎng)基中NOS,NO,組織型纖溶酶原激活物(tPA)和纖溶酶原激活物抑制劑(PAI-1)水平的變化,同樣用蛋白含量校正由于各孔細胞數(shù)目不一樣所帶來的誤差,以真實反映不同組之間的差別。結(jié)果表明,HDL可以提高HUVECs培養(yǎng)基中NOS活性和NO含量,可能是HDL在體內(nèi)的內(nèi)皮保護作用機理之一
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