氧化損傷與修復(fù)機(jī)制在黃曲霉毒素相關(guān)原發(fā)性肝癌的發(fā)生與化療反應(yīng)性中的作用.pdf

1、一、黃曲霉毒素B1對(duì)原發(fā)性肝癌患者外周血淋巴細(xì)胞氧化損傷的實(shí)驗(yàn)研究目的：通過(guò)低濃度黃曲霉毒素B1處理體外培養(yǎng)外周血淋巴細(xì)胞，了解黃曲霉毒素B1對(duì)體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞氧化損傷及修復(fù)機(jī)制的影響；同時(shí)探討潛在性功能性DNA修復(fù)基因多態(tài)性在其中的作用。 方法：采取10例健康人和20例肝癌患者外周血淋巴細(xì)胞作為研究對(duì)象，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)不同劑量黃曲霉毒素B1誘導(dǎo)的DNA氧化損傷水平，同時(shí)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)超氧化物岐化酶(SOD)、脂質(zhì)過(guò)氧化損傷產(chǎn)物

2、一丙二醛(MDA)、羥自由基(OH)及活性氧含量，以了解黃曲霉毒素B1對(duì)體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞抗氧化能力、質(zhì)過(guò)氧化損傷及氧化水平的影響。此外，運(yùn)用RT-PCR檢測(cè)黃曲霉毒素B1誘導(dǎo)后淋巴的DNA損傷修復(fù)酶基因P53、P21、hOGGl、APE、PARP的表達(dá)，并對(duì)APE、hOGGl基因分型。采用基因組學(xué)與毒理學(xué)相結(jié)合、基因結(jié)構(gòu)和基因功能相結(jié)合的方法考察潛在性功能性DNA修復(fù)酶多態(tài)性。 結(jié)論 1．黃曲霉毒素B1暴露后肝癌患者外周

3、血淋巴細(xì)胞的氧化損傷比正常人為高。 2．黃曲霉毒素B1暴露后淋巴細(xì)胞的損傷主要由黃曲霉毒素B1誘導(dǎo)產(chǎn)生過(guò)多的OH<'->所致。 3．黃曲霉毒素B1暴露后淋巴細(xì)胞內(nèi)8-oxoG水平與修復(fù)酶APE基因型相關(guān)。攜帶變異基因型APE 148Asp者黃曲霉毒素B1誘導(dǎo)后淋巴細(xì)胞的DNA損傷較重。二、DNA修復(fù)酶hOGGl和PARP在原發(fā)性肝癌和肝硬化組織中差異表達(dá)的臨床病理意義 目的：通過(guò)檢測(cè)DNA修復(fù)酶hOGGl及PA

4、RP在原發(fā)性肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)及肝硬化組織中的表達(dá)，探討hOGGl和PARP在HCC和肝硬化組織中的表達(dá)特點(diǎn)及其與臨床病理因素的關(guān)系。 結(jié)論 在HCC發(fā)生過(guò)程中hOGGl蛋白在肝細(xì)胞核中的表達(dá)可能隨著病程進(jìn)展而增強(qiáng)，PARP蛋白在肝細(xì)胞核中的表達(dá)可能隨著病程進(jìn)展而降低，可能反應(yīng)了從肝硬化到肝癌進(jìn)程中肝細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài)的改變。三、術(shù)前化療對(duì)DNA修復(fù)酶hOGGl及PARP在原

5、發(fā)性肝癌組織中表達(dá)的影響 目的：通過(guò)檢測(cè)DNA修復(fù)酶hOGGl及PAP在原發(fā)性肝癌及癌旁組織中的表達(dá)，探討術(shù)前化療對(duì)損傷修復(fù)機(jī)制的影響。 結(jié)論 1．術(shù)前化療可以殺傷對(duì)氧化損傷敏感的肝癌細(xì)胞，表現(xiàn)為未化療組癌組織hOGGl蛋白表達(dá)高于化療組癌組織，未化療組癌組織PARP蛋白表達(dá)低于化療組癌組織。 2．經(jīng)過(guò)術(shù)前化療藥物篩選的DNA損傷修復(fù)能力加強(qiáng)的癌細(xì)胞如果逃避了手術(shù)切除可能成為術(shù)后復(fù)發(fā)的來(lái)源。 3．