谷氨酰胺和精氨酸強(qiáng)化的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)大鼠重型顱腦損傷后免疫功能及蛋白代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：重型顱腦損傷(SevereHeadInjury，SHI)后的過(guò)度應(yīng)激反應(yīng)常導(dǎo)致代謝紊亂和免疫功能低下，從而使機(jī)體容易繼發(fā)感染，文獻(xiàn)報(bào)道患者的感染率可高達(dá)50-70％，而營(yíng)養(yǎng)狀況和感染的發(fā)生密切相關(guān)。因此，如何有效改善患者營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，維持正常的免疫功能，對(duì)減少重型顱腦損傷后感染的發(fā)生具有重要意義。目前臨床常規(guī)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑有要素膳、完全非要素膳、組件型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑及特殊應(yīng)用型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑，但由于危重患者多存在頑固的高分解代謝，嚴(yán)重的酸堿

2、失衡和水電解質(zhì)紊亂，對(duì)營(yíng)養(yǎng)底物的利用和耐受程度降低，故傳統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)支持模式對(duì)改善重癥患者的營(yíng)養(yǎng)不良和免疫功能低下不甚理想。近年隨著臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)的發(fā)展和對(duì)機(jī)體代謝規(guī)律的深入研究，提出了免疫營(yíng)養(yǎng)(immunonutrition)這一新概念，免疫營(yíng)養(yǎng)的實(shí)質(zhì)即為在常規(guī)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑中添加具有免疫調(diào)節(jié)和胃腸保護(hù)作用的特殊營(yíng)養(yǎng)素，達(dá)到調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能，促進(jìn)組織修復(fù)，改善患者預(yù)后等目的。這類(lèi)營(yíng)養(yǎng)制劑也稱之為免疫增強(qiáng)型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑(immune-enhanc

3、ingdiets，IEDs)。較為肯定的免疫營(yíng)養(yǎng)素有谷氨酰胺(Glutamine，Gln)、精氨酸(Arginine，Arg)、ω-3脂肪酸和纖維素等。其中Gln和Arg是療效明確，副作用最小的免疫營(yíng)養(yǎng)藥物。目前對(duì)Gln和Arg強(qiáng)化的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)研究主要集中在復(fù)合傷、燒傷、腫瘤術(shù)后等領(lǐng)域，已證實(shí)了它們可改善機(jī)體的免疫功能和營(yíng)養(yǎng)代謝，降低感染性并發(fā)癥的發(fā)生率。但是，也有研究表明對(duì)伴有嚴(yán)重感染的危重患者IEDs可增加死亡率，故IEDs是否適用于

4、各類(lèi)危重癥患者尚存在爭(zhēng)議，IEDs是否可用于重型顱腦損傷后免疫功能低下的患者，相關(guān)報(bào)道較少。 目的：以氣動(dòng)沖擊致重型顱腦損傷大鼠為模型，旨在探討Gln和Arg強(qiáng)化的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)重型顱腦損傷機(jī)體免疫功能和蛋白代謝的影響，為探求重型顱腦損傷患者理想的營(yíng)養(yǎng)支持提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：72只Sprague-Dawlay(SD)大鼠常規(guī)適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，采用氣動(dòng)沖擊致傷裝置建立重型顱腦損傷大鼠模型，解剖和病理切片可以觀察到大鼠大腦不同的

5、部位出現(xiàn)腦挫裂傷、出血或硬膜下血腫等。采用隨機(jī)表法，將動(dòng)物隨機(jī)分為正常對(duì)照組(normalcontrol，C組)、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組(enteralnutrition，EN組)、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)添加Gln組(Gln組)、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)添加Arg組(Arg組)、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)添加Gln和Arg組(Gln+Arg組)。C組8只動(dòng)物，其余各組16只。C組不致傷，其余4組于致傷后4小時(shí)開(kāi)始經(jīng)胃腸道灌胃等氮、等熱卡的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑，第一天給予半量71.49Kcal/kg.d，

6、第二天給予全量142.97Kcal/kg.d，每日2次。分別選擇傷后3天、7天時(shí)相點(diǎn)取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物外周血標(biāo)本。采用吞噬白色念珠菌計(jì)數(shù)法、鏈酶親和素-生物素法(SABC)、放射免疫法(Radioimmunoassay，RIA)和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay，ELISA)分別測(cè)定白細(xì)胞吞噬功能、T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)、血清白介素-2(Interleukin-2，IL-2)水平、胰島

7、素(Insulin，INS)、胰高血糖素(Glucagon，GIU)、皮質(zhì)醇(Cortisol，Cor)、視黃醇結(jié)合蛋白(Retinol-bindingProtein，BPR)和前白蛋白(Prealbumin，PA)的含量。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，單因素方差分析，以P＜0.05為相差顯著，P＜0.01為相差非常顯著。 結(jié)果： 1.成功建立了大鼠重型顱腦損傷模型 本實(shí)驗(yàn)采用氣動(dòng)

8、沖擊致重型顱腦損傷大鼠模型。模型死亡率達(dá)20％左右。觀察致傷大鼠大腦解剖和病理變化，顯示大腦不同的部位存在腦挫裂傷、出血或硬膜下血腫等；傷后24小時(shí)HE染色可見(jiàn)海馬區(qū)明顯出血。因此，可以判定本研究的動(dòng)物模型符合重型顱腦損傷的標(biāo)準(zhǔn)。 2.Gln和Arg強(qiáng)化的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)重型顱腦損傷大鼠細(xì)胞免疫的影響 傷后第3天EN組、Gln組、Arg組和Gln+Arg組的CD4+細(xì)胞比例、CD4+/CD8+比值、IL-2水平以及白細(xì)胞吞噬率

9、和C組相比非常顯著下降(P＜0.01)，EN組非常顯著低于其它實(shí)驗(yàn)組(P＜0.01)。到第7天，Gln組、Arg組和EN組的細(xì)胞免疫值比第3天有上升趨勢(shì)，但仍顯著低于C組(P＜0.01)，Gln組和Arg組始終高于EN組(P＜0.01)。Gln組和Arg組之間在各時(shí)相相差均不顯著(P＞0.05)。Gln+Arg組在第3天顯著高于Gln組和Arg組(P＜0.01)，第7天接近傷前水平(P＞0.05)。 3.Gln和Arg強(qiáng)化的腸內(nèi)

10、營(yíng)養(yǎng)對(duì)重型顱腦損傷大鼠蛋白質(zhì)代謝的影響 3.1蛋白含量的改變 EN組、Gln組、Arg組和Gln+Arg組在傷后第3天PA及RBP和C組相比非常顯著下降(P＜0.01)，各組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。到了第7天EN組的PA及RBP雖都有上升趨勢(shì)，但仍顯著低于正常水平(P＜0.01)，而此時(shí)Gln組，Arg組和Gln+Arg組比EN組均顯著升高(P＜0.05～0.01)，接近正常水平。Gln組，Arg組和Gln+A

11、rg組在第7天無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 3.2代謝激素的改變 傷后第3天EN組、Gln組、Arg組和Gln+Arg組的Cor較C組顯著增高(P＜0.05～0.01)，INS/GLU則顯著降低(P＜0.01)。EN組的Cor在各時(shí)相點(diǎn)都顯著高于其它三個(gè)實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05～0.01)。Gln+Arg組的Cor在第3天和Gln組、Arg組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但第7天則低于這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05～0.0

12、1)，接近傷前水平(P＞0.05)。Gln組和Arg組的INS/GLU在第7天明顯高于EN組(P＜0.05)，而Gin+Arg組在各時(shí)相點(diǎn)明顯高于這三個(gè)實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05～0.01)。Gln組和Arg組的Cor和INS/GLU在各時(shí)相點(diǎn)都無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 結(jié)論： 1.Gln和Arg強(qiáng)化的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)可提高重型顱腦損傷機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，改善蛋白代謝和代謝激素分泌紊亂。 2.Gln和Arg聯(lián)合使用比單獨(dú)