孕鼠暴露于炎癥免疫刺激劑導(dǎo)致仔鼠出生后血壓升高、體重增加及機(jī)制初步研究.pdf

1、心血管疾病是當(dāng)今世界威脅人類健康最嚴(yán)重的疾病之一，其發(fā)病率和死亡率已超過(guò)腫瘤性疾病而躍居第一。高血壓發(fā)病率日益增高，成為心血管疾病最主要的危險(xiǎn)因素之一。其根本病因至今未明，因而探求病因?qū)Ω哐獕旱脑缙陬A(yù)防、及時(shí)治療都有極其重要的意義。近年來(lái)對(duì)于炎癥在心血管疾病過(guò)程中發(fā)揮了重要作用的相關(guān)研究取得了重大的進(jìn)步，并且越來(lái)越多的臨床調(diào)查證據(jù)表明，高血壓在某些方面上也與炎癥密切相關(guān)。有學(xué)者通過(guò)對(duì)婦女健康調(diào)查發(fā)現(xiàn)高血壓發(fā)病的危險(xiǎn)性同C反應(yīng)蛋白的水平增

2、高存在正相關(guān)性。另有研究證明在高血壓病人炎癥因子IL-6的水平是升高的，并且血壓升高的水平同該細(xì)胞因子升高的水平存在一定的關(guān)聯(lián)。更為有趣的是，有研究者發(fā)現(xiàn)母鼠在其妊娠期間腹腔注射IL-6，會(huì)導(dǎo)致仔鼠出生后血壓升高和HPA軸活性的增加。眾所周知，IL-6是一個(gè)促炎因子，那么，孕鼠注射IL-6可能會(huì)引起母體的全身炎癥反應(yīng)。究竟在子代發(fā)生的高血壓是因?yàn)镮L-6這個(gè)特殊的細(xì)胞因子本身所具有的某些特殊作用所引起，還是因?yàn)槟阁w的炎癥免疫反應(yīng)所導(dǎo)致的

3、呢?目前沒(méi)有學(xué)者對(duì)該方向進(jìn)行相關(guān)報(bào)道。基于該設(shè)想，我們選取來(lái)自革蘭氏陰性細(xì)菌的脂多糖(lipopolysaccharide，LPs)和來(lái)自真菌的酵母多糖(zymosan)作為炎癥免疫反應(yīng)刺激劑，觀察孕鼠在妊娠期暴露于該兩種刺激劑，其子代大鼠是否在出生后出現(xiàn)高血壓，并對(duì)其可能的機(jī)制進(jìn)行初步探索。 方法 1．24只通過(guò)檢查陰栓獲得準(zhǔn)確妊娠時(shí)間的懷孕SD大鼠，隨機(jī)分為3組，在妊娠8、10、12天，三組孕鼠分別腹腔注射0.79m

4、g/kgLPS、0.79mg/kg酵母多糖和無(wú)菌生理鹽水。在注射后1小時(shí)鼠尾取血用ELISA方法檢測(cè)血清TNF-α水平。子代大鼠隨機(jī)選取用于該實(shí)驗(yàn)(雄性：對(duì)照組，n=12；LPS組，n=12；酵母多糖組，n=12；雌性：對(duì)照組，n=12；LPS組，n=12；酵母多糖組，n=12)。 2．幼鼠出生后，從4周齡斷奶開(kāi)始到24周齡，每2周稱量體重1次。從6周齡到24周齡，每2周鼠尾無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量技術(shù)監(jiān)測(cè)血壓1次，每6周監(jiān)測(cè)血糖1次。15

5、周齡時(shí)監(jiān)測(cè)食物攝取量1周。24周齡，鼠尾取血分別用ELISA法監(jiān)測(cè)血清中的IL-6、聚乙二醇法測(cè)CIC水平，并對(duì)仔鼠腹腔注射炎癥刺激劑LPSlmg/kg，觀察注射前及注射后2h、4h、8h的血清TNF-α水平。在24周齡末斷頭處死大鼠，取腹腔各部位脂肪測(cè)其濕重，取血清放免法測(cè)瘦素(Leptin)水平。 結(jié)果 1．孕鼠在腹腔注射LPS和zymosan后1h，其血清TNF-α水平較對(duì)照組明顯升高(P<0.01)，說(shuō)明在LPS

6、和酵母多糖組，母鼠均發(fā)生了炎癥免疫反應(yīng)。 2．對(duì)照組、LPS組、zymosan組每只孕鼠生育仔鼠的數(shù)量、雌雄比例及胎鼠出生體重，各組之間均沒(méi)有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 3．給予LPS和zymosan腹腔注射的孕鼠，其所生出的無(wú)論雄性還是雌性仔鼠，尾動(dòng)脈收縮壓均較同性別對(duì)照組仔鼠的收縮壓顯著升高(P<0.05)，在24周齡時(shí)血壓達(dá)到高血壓標(biāo)準(zhǔn)。 4．在LPS、zymosan組，雄性仔鼠體重從6周齡開(kāi)始，雌性

7、仔鼠體重從14周齡開(kāi)始，較對(duì)照組同性別仔鼠出現(xiàn)顯著升高(P<0.05)，脂肪組織重量，食物攝取量較對(duì)照組仔鼠非常顯著增多(P<0.01)，瘦素水平明顯升高(P<0.01)。 5．血清中的血糖水平，LPS組、zymosan組仔鼠同對(duì)照組仔鼠無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P>0.05)。 6．仔鼠未接觸炎癥刺激劑情況下，血清中細(xì)胞因子IL-6、TNF-α和血清循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)水平，L=PS組、zymosan組較對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

8、差異(P>0.05)。 7．仔鼠被給予LPS1mg/kg腹腔注射后，2h、4h、8h鼠尾血清TNF-α水平，無(wú)論LPS組還是zymosan組，均較對(duì)照組水平出現(xiàn)顯著升高(P<0.01)，相關(guān)性分析顯示，血清TNF-α水平同仔鼠的血壓和體重具有顯著的正相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論 1．應(yīng)用孕鼠腹腔注射LPS、zymosan，導(dǎo)致仔鼠出生后血壓升高、體重增加，首次成功建立了母體孕期炎癥免疫刺激導(dǎo)致子代血壓升高、體重增