低碘孕鼠補充甲狀腺激素對仔鼠腦組織中NKXs表達(dá)的影響.pdf

1、目的： Nkxs基因家族與腦組織的發(fā)育密切相關(guān)[1，2]，本文為了研究低碘孕鼠補充甲狀腺激素是否可以起到調(diào)節(jié)NKXs表達(dá)水平的作用，以及了解最佳的調(diào)節(jié)時期及調(diào)節(jié)劑量，初步探討低碘導(dǎo)致的腦發(fā)育遲滯與NKXs表達(dá)水平之間的關(guān)系。 方法： 我們復(fù)制了碘缺乏致低甲狀腺激素的孕鼠模型，并且在仔鼠腦發(fā)育的早期和中晚期給予母鼠不同劑量的甲狀腺激素，以給藥時期和給藥劑量確定各給藥組別，另外設(shè)置正常組及低碘組，分別以各組別孕17

2、天、新生及20日齡仔鼠為實驗動物。根據(jù)每個基因在腦發(fā)育過程中作用的關(guān)鍵時期不同，我們側(cè)重了解其在關(guān)鍵時期的表達(dá)水平。利用熒光實時定量PCR技術(shù)檢測正常組、低碘組及各給藥組仔鼠腦組織中nkxs表達(dá)水平；免疫組織化學(xué)染色檢測仔鼠腦組織中Nkx2.1蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.利用熒光實時定量PCR技術(shù)檢測正常組、低碘組及各給藥組仔鼠腦組織中nkxs表達(dá)水平： (1) Nkx2.1在正常組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下

3、降(P<0.05)，低碘組各時期均低于同時期正常組的表達(dá)水平(P<0.05)，早期中劑量給藥組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下降(P<0.05)，且在孕17天時與正常組同時期的水平相近(P>0.05)： (2)Nkx2.2基因在正常組的表達(dá)從平均趨勢上看，隨年齡增長而逐漸上升，低碘組各時期均高于同時期正常組的表達(dá)水平(P<0.05)，中晚期中劑量組在新生期、生后20天與正常組同時期的水平相近(P>0.05)； (3) Nkx

4、6.1在正常組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下降(P<0.05)，低碘組孕17天時低于同時期正常組的表達(dá)水平(P<0.05)，新生期與生后20天高于同時期正常組的水平(P<0.05)，早期中劑量組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下降(P<0.05)，且在孕17天時與正常組同時期的水平相近(P>0.05)； (4) Nkx6.2基因從平均趨勢上看，正常組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸上升(P>0.05)，低碘組各時期與正常組同時期的表達(dá)水平相比

5、，差別不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，各給藥組之間差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，接近正常組的表達(dá)水平(P>0.05)。 2.免疫組織化學(xué)染色檢測仔鼠腦組織中Nkx2.1蛋白的表達(dá)水平：Nkx2.1蛋白在各組別不同時期的表達(dá)水平的差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=5，575，P<0.05)。從平均趨勢上看，正常組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下降，孕17天與新生期之間的差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，低碘組各時期均低于同時期正常組的表達(dá)

6、水平(P<0.05)，早期中劑量組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下降(P<0.05)，且在孕17天時與正常組的水平最相近。 結(jié)論： 1.正常組與低碘組比較：Nkx2.1、nkx6.1、Nkx2.1蛋白在正常組的表達(dá)水平隨年齡增長而逐漸下降，低碘組各時期普遍低于同時期正常組的表達(dá)水平；Nkx2.2、nkx6.2基因在正常組的表達(dá)從平均趨勢上看，隨年齡增長而逐漸上升，Nkx2.2低碘組各時期高于同時期正常組的表達(dá)水平，nkx6.

7、2在低碘組與正常組同時期的表達(dá)水平相比，差別不具有統(tǒng)計學(xué)意義。 2.各給藥組比較：Nkx2.1、nkx6.1、Nkx2.1蛋白的測定水平表明，在低碘孕鼠的孕早期給予中等劑量的甲狀腺激素，可以使子代達(dá)到接近正常的基因水平。Nkx2.2測定水平表明，在低碘孕鼠的孕中晚期給予中等劑量的甲狀腺激素，可以使子代達(dá)到接近正常的基因水平。Nkx6.2各給藥組的處理對其影響較小。因此，對于低碘孕鼠從孕早期至腦發(fā)育的晚期持續(xù)給予中等劑量(2μg/