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1、腎綜合征出血熱病毒(HFRSV)為布尼亞病毒科漢坦病毒(HV)屬成員.因其致病性強(qiáng),世界衛(wèi)生組織已將其列為潛在的生物戰(zhàn)劑.其中漢灘型(HTN)與漢城型(SEO)在中國廣泛分布,引起發(fā)病率和病死率較高的腎綜合征出血熱(HFRS),每年病例占全球總病例的90﹪以上.材料和方法 根據(jù)鼠源抗體可變區(qū)(V)氨基酸序列,設(shè)計合成一組抗體重、輕鏈可變區(qū)(VH/VK)簡并引物.采用一步法提取單克隆抗體(McAb)H7、B11和F3細(xì)胞總RNA,通過RT
2、-PCR擴(kuò)增V基因,并進(jìn)行核苷酸序列測定和分析.同時,利用McAbF3及B11,應(yīng)用噬菌體肽文庫篩選特異性的抗體結(jié)合肽,夾心ELISA和競爭抑制試驗分析獲得的噬菌體短肽與篩選配基的結(jié)合能力及特異性,陽性克隆序列測定和同源性分析;在此基礎(chǔ)上,通過動物免疫試驗初步分析噬菌體顆?？乖拿庖咴?結(jié)論 上述McAb 可變區(qū)基因的獲得及模擬表位的初步鑒定,為有目的地開展HFRSV 基因工程抗體的遺傳改造及體外親和力成熟等研究,以及基于表位的HFR
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