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1、青島大學碩士學位論文RNA干擾EGFR基因?qū)β殉舶┘毎蛲龊图毎芷诘挠绊懶彰簭埣t玲申請學位級別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學指導教師:陳愛平20090530TheEffectofRNAinterferencetoEGFRGeneoncellcycleandapoptosisofovariancancercelllineskov3AbstractobjectiveToconstructexpressionvectorofEGFRspecific
2、siRNAandtransfectitintohumanovariancancercelllineskov3ToinvestigatetheeffectofRNAinterferenceonthetargetgeneexpression,cellapoptosisandthecycleofthecelllineMethodsAccordingtoEGFRmRNAsequence,wedesignedandsynthesizedshRNA
3、targetedEGFRwhichweredirectlyclonedintopSilencerTM21一U6neoplasmidDNAsequencingconfirmedwhethertheinsertionsequencewascorrectornotThentransfectedtherecombinantplasmidintohumanovariancancercelllineskov3withlipofectamine200
4、0Therewerethreegroups:normalcontrol;non—specifictransfectandEGFRshRNAtransfectTheinhibitiveeffectofRNAionmRNAlevelandproteinlevelwererespectivelydetectedbyRTPCRandimmunocytochemistryAnnexinV/Pldoublestrainingbyflowc”omet
5、巧analysiswasusedtoevMuateapoptosisPIstrainingWaSconductedtoevaluatecellcyclearrestResultsPlasmidexpressivevectorsaimeddirectlyatEGFRweresuccessfullyestablishedEGFRsiRNAplasmidknockeddownEGFRexpressioninSkov3cellsobviousl
6、yFlowcytometryanalysisrevealedovariancarcinomacelllineSkov3sufferedanotableapoptosisandGdGtarrestafterRNAinterferencemediatedbysiRNAtargetingEGFRConclusionEGFRsilencingbyRNAicaninducecellapoptosisandarrestcellcycleatGo/G
7、iphase,whichshedslightonthepossibleuseofRNAiforfurtherinvestigationofthepathogenesisandgenetherapyofovariancarcinomaPostgraduatestudent:HongLingZhang(ObstetricsandGynecology)DirectedbyProfAiPingChenKeywords:ovarianneopla
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