原發(fā)性高血壓病靶器官損害過程中的多基因調(diào)控.pdf

1、本研究旨在分別評價血栓調(diào)節(jié)蛋白(thrombomodulin，TM)基因、轉(zhuǎn)化生長因子-β<,1>(transforminggrowth factor—beta-1，TGF—β<,1>)基因和白細(xì)胞介素-10(interleukin 10，IL-10)基因這三個基因多態(tài)性對高血壓及其心血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的影響。 1、可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白基因可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(Soluble thrombomodulin，sTM)作為內(nèi)皮損傷或內(nèi)皮

2、功能障礙的特殊血漿標(biāo)志物可能與高血壓并發(fā)癥有關(guān)，并可能影響血壓高低。選擇高血壓患者286例，高血壓伴冠心病(coronary heart disease，CHD)患者113例和年齡性別相匹配的健康對照者213例，采用聚合酶鏈反應(yīng)一限制性片段長度多態(tài)性(PCR—RFLP)分析方法檢測TM-33G>A多態(tài)性，流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測TM在單核細(xì)胞表面的表達(dá)以及ELISA測定血漿sTM水平。 研究結(jié)果：單核細(xì)胞表面的TM水平在高血壓患者尤

3、其是高血壓伴CVD患者中呈現(xiàn)低表達(dá)，并且與TM-33位點多態(tài)性相關(guān)。但sTM和TM-33位點A等位基因頻率在高血壓組和健康對照組之間以及在高血壓組和CVD組之間無顯著性差異。同樣基因型分布在各組之間亦無顯著性差異，GG基因型.bGA+AA基因型之比在EH組為77％：23％；CVD組為79.7％：20.3％：對照組為81.2％：18.8％。 (與對照組比較均P>0.05)。用高血壓公認(rèn)的危險因素(吸煙，飲酒，膽固醇)校正后，TM-33位點

4、基因型分布和等位基因頻率仍無顯著性差異。 研究結(jié)論：TM-33G>A多態(tài)性似乎與漢族人群高血壓及CHD發(fā)病無明顯相關(guān)。TM基因多態(tài)性可能影響其在細(xì)胞表面的表達(dá)，細(xì)胞表面TM低表達(dá)可能是高血壓CHD發(fā)病的危險因素，但這種表達(dá)差異可能在高血壓發(fā)生發(fā)展過程中被其他因素的影響所掩蓋。 2、轉(zhuǎn)化生長因子-β<,1>基因流行病學(xué)、臨床和試驗研究提示轉(zhuǎn)化生長因子-β<,1>(transfor-ming growthfactor-bet

5、a-1，TGF-β<,1>)可能在高血壓的發(fā)病過程中起重要作用，TGF-β<,1>是一種多潛能的生長因子，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和分化，調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)及其修復(fù)，從而進(jìn)一步調(diào)節(jié)炎癥和免疫應(yīng)答，參與血管的修復(fù)，而這一過程與高血壓血管和靶器官損害的發(fā)病有關(guān)。TGF-β<,1>也可以通過刺激內(nèi)皮素-1和/或腎上腺素的分泌調(diào)節(jié)血壓。本研究旨在探討循環(huán)水平的TGF-β<,1>蛋白與血壓的相關(guān)關(guān)系，以及TGF-β<,1>基因多態(tài)性各等位基因及基因型在高血

6、壓病冠心病患者中的分布頻率，分析其基因型和血清水平與高血壓病冠心病的相關(guān)關(guān)系。 研究方法：采用序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-SSP)，檢測286例高血壓病患者、113例高血壓冠心病患者及213名正常對照者TGF-β<,1>基因+869T/C、+915G/C多態(tài)性，同時采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定血清TGF-β<,1>水平。 研究結(jié)果：高血壓冠心病組血清TGF-β<,1>水平顯著高于高血壓組和對照組，高血壓

7、組顯著高于對照組，均P<0.05。T6F-β<,1>基因+915G/C多態(tài)性在高血壓組、冠心病組和正常人群中的分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)，而TGF-β<,1>+869T/C基因多態(tài)性在冠心病組和正常人群中的分布差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)，等位基因頻率的相對風(fēng)險分析發(fā)現(xiàn)，C等位基因攜帶者患高血壓病冠心病的風(fēng)險是T等位基因的1.681倍(OR=1.681，95％ CI：1.213～2.328)，提示TGF-β<,1>

8、+869位點C等位基因可能是冠心病的危險因素之一。攜帶C等位基因的高血壓冠心病患者血清TGF-β<,1>水平顯著高于不攜帶者，呈現(xiàn)CC基因型者TGF-β<,1>水平顯著高于TC基因型者，TC基因型者TGF-β<,1>水平顯著高于TT基因型者(CC：TC：TT為7.06±0.69：6.84±0.75：6.12±0.58。表明TGF-β<,1>+869T/C位點的等位基因僅有一個發(fā)生改變即可以影響其蛋白水平的表達(dá)，C等位基因是TGF-β<,

9、1>的高表達(dá)基因。 研究結(jié)論：TGF-β<,1>基因+869T/C多態(tài)性與高血壓、冠心病的發(fā)病具有相關(guān)性，其中C等位基因可能是高血壓、冠心病發(fā)病的遺傳易感基因；攜帶C等位基因的個體可能通過促進(jìn)TGF-β<,1>的高度表達(dá)進(jìn)而增加了高血壓冠心病的發(fā)病風(fēng)險，并且TGF-β<,1>對冠心病的影響可能獨立于血壓水平之上，支持TGF-β<,1>對冠心病的影響可能是通過細(xì)胞外基質(zhì)的沉積而發(fā)揮作用的理論。而TGF-β<,1>基因+915G/C

10、多態(tài)性與高血壓和冠心病的發(fā)病風(fēng)險無顯著關(guān)聯(lián)。 3、白細(xì)胞介素-10基因白介素-10(interleukin-10，IL-10)是由巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，通過抑制促炎性細(xì)胞因子和B細(xì)胞的活性發(fā)揮抗炎作用，IL-10在人類動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)的早期和進(jìn)展中均有表達(dá)，并能抑制許多與動脈粥樣硬化斑塊形成、破裂和血栓形成有關(guān)的細(xì)胞進(jìn)程。冠心病的病理基礎(chǔ)是動脈粥樣硬化和血栓形成。動脈粥樣硬化

11、的形成對損傷血管內(nèi)膜而言既是免疫反應(yīng)過程，又是炎性反應(yīng)的過程。 IL-10是主要的炎性調(diào)節(jié)因子，其分泌大約有75％由遺傳因素決定，因此，IL-10基因可能與動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥有關(guān)，是研究冠心病的一個有潛力的候選基因。本研究旨在探討白細(xì)胞介素-10(IL-10)基因-627位點多態(tài)性與早發(fā)冠心病和血清IL-10水平的相關(guān)關(guān)系。 研究方法：應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)一限制性片斷長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析方法，檢測早發(fā)冠心病(CHD

12、)患者163例和正常對照者112例IL-10基因-627位點多態(tài)性，采用ELISA法檢測血清IL-10水平。 研究結(jié)果：IL-10因-627位點基因型和等位基因頻率在冠心病組和對照組之間無顯著性差異，x<'2>值分別為1.9324，1.5703，P>0.05。按性別分層分析IL-10因型和等位基因頻率，男性組x<'2>值分別為1.2708，0.8595，P>0.05；女性組x<'2>值分別為0.8254，0.7127，P>0.0