治療劑量不同免疫抑制劑對(duì)雄性大鼠生長(zhǎng)發(fā)育及泌尿生殖系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的：觀察腎移植術(shù)后首劑治療劑量的不同免疫抑制劑對(duì)獨(dú)腎模型大鼠生長(zhǎng)發(fā)育及泌尿系統(tǒng)的影響，為腎移植術(shù)后免疫抑制劑治療方案的選擇提供參考依據(jù)。
　　方法：按公式將腎移植患者術(shù)后患者的環(huán)孢素A（Cyclosporin A，CsA）、他克莫司（Tacrolimus，F(xiàn)K506）和雷帕霉素（Rapamycin，Rapa）的首劑治療劑量換算為大鼠的用藥劑量。構(gòu)建大鼠獨(dú)腎模型，將建模成功的40只大鼠隨機(jī)分為8組，分別為正常組、對(duì)照組、CsA（2

2、5mg/kg/d）組、FK506（0.8mg/kg/d）組和Rapa（0.2mg/kg/d）組，每組8只。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每周稱重2次，依據(jù)大鼠體重調(diào)整胃飼藥物用量；第2、4、6、8周留24h尿液，行尿常規(guī)及蛋白定量檢測(cè)；第6周測(cè)定血藥濃度；第8周測(cè)定各組大鼠血壓變化；試驗(yàn)結(jié)束后乙醚麻醉下抽取5ml血液，行血常規(guī)、生化指標(biāo)檢測(cè)；稱取右側(cè)腎臟重量，并計(jì)算臟器系數(shù)；HE染色觀察每組腎臟病理改變。透射電鏡觀察大鼠腎臟超微結(jié)構(gòu)改變。
　　結(jié)果：

3、
　　1、CsA組大鼠處死前體重與體重增長(zhǎng)值明顯少于其他組大鼠(p<0.001)，而FK506組及Rapa組大鼠實(shí)驗(yàn)期間的體重增長(zhǎng)值與正常組及對(duì)照組相似，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)；
　　2、治療劑量CNI類藥物可引起大鼠高血壓變化，其中CsA較FK506明顯升高大鼠平均動(dòng)脈收縮壓，治療劑量Rapa對(duì)大鼠血壓影響較?。?br>　　3、各組大鼠2周前尿量無(wú)顯著差異，CsA組第4、6和8周尿量均比對(duì)照組明顯減少，各時(shí)間點(diǎn)水平依

4、次升高，并且有顯著性差異（p<0.05）。FK506組、Rapa組尿量變化隨實(shí)驗(yàn)周期延長(zhǎng)而不斷增加，且與正常組及對(duì)照組保持一致水平，無(wú)明顯差異（p>0.05）；
　　4、CsA組及FK506組大鼠24h尿蛋白為1545.0±164.3 mg/d及1390.2±116.1 mg/d，與正常對(duì)照組比較具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），Rapa組大鼠24小時(shí)尿蛋白1305.2±195.11 mg/d與正常對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　

5、　5、各組24h尿肌酐定量于第4周開始出現(xiàn)顯著性差異（p<0.05），F(xiàn)K506組、CsA組24h尿肌酐定量分別為5016.0±437.9μmol/d及5116.3±566.1μmol/d，明顯高于Rapa組大鼠24小時(shí)肌酐定量水平，Rapa組與正常對(duì)照組比較無(wú)明顯差異（p>0.05）
　　6、治療劑量CsA組大鼠模型血尿素氮（BUN）、血肌酐（Cr）及尿酸（UA）均明顯升高，與正常對(duì)照組及Rapa組存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.0

6、5)，治療劑量FK506組大鼠模型血尿素氮（BUN）及尿酸（UA）較正常對(duì)照組明顯升高，提示腎功能輕度受損。治療劑量Rapa組大鼠腎功能（BUN、Cr、UA）變化與正常組及對(duì)照組相似，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；
　　7、CsA組和FK506組的肌酐清除率均低于正常對(duì)照組(p<0.05)，其中治療劑量CsA組的肌酐清除率為0.24±0.05 ml/min，明顯低于正常組肌酐清除率(p<0.001)；FK506組的肌酐清除率為

7、1.05±0.19 ml/min，與正常對(duì)照組及CsA組比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；Rapa組肌酐清除率介于正常對(duì)照組與FK506組之間，但與兩者的比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　8、鏡下觀察：治療劑量 CsA組腎小球重度硬化，玻璃樣變，腎小球囊增厚，增厚的腎小球囊腔變窄，腎小球及間質(zhì)炎性細(xì)胞增多，系膜細(xì)胞空泡變性，細(xì)胞數(shù)量減少，可見局灶節(jié)段性硬化，損傷指數(shù)高于對(duì)照組（p<0.01）。治療劑量 FK506組腎小球輕度硬化，輕

8、微玻璃樣變，腎小球囊增厚，增厚的腎小球囊腔變窄。腎小球及間質(zhì)炎性細(xì)胞增多，系膜細(xì)胞空泡變性，細(xì)胞數(shù)量逐漸減少，尚未見局灶節(jié)段性硬化，損傷指數(shù)高于對(duì)照組（p<0.05）。治療劑量Rapa組腎小球及間質(zhì)水腫，可見紅細(xì)胞，未見玻璃樣變，腎小球囊較薄，腎小球及間質(zhì)未見大量炎性細(xì)胞，系膜細(xì)胞空泡變性。
　　9、超微結(jié)構(gòu)改變：治療劑量 CsA組腎小球足細(xì)胞足突腫脹變寬，大量足突粘連、倒伏，部分融合。系膜細(xì)胞增生，細(xì)胞外基質(zhì)增多，基質(zhì)中出現(xiàn)膠原

9、纖維增生，線粒體嵴腫脹、線粒體腫脹空泡化。FK506組腎小球足細(xì)胞足突部分腫脹變寬，部分足突粘連、倒伏，部分融合細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)疏松，核漿比例失調(diào)，細(xì)胞退行性變，線粒體嵴腫脹。Rapa組腎臟超微結(jié)構(gòu)形態(tài)：腎小球足細(xì)胞接近正常組形態(tài)，仍可見部分足突融合?？梢娯S富線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，未見明顯線粒體腫脹。
　　結(jié)論：
　　1、腎移植術(shù)后首劑治療劑量的CsA對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育有嚴(yán)重的影響；治療劑量的FK506及Rapa對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)明顯影響

10、。
　　2、腎移植術(shù)后首劑治療劑量的CsA對(duì)大鼠腎臟具有明顯的腎毒性，使得其腎功能下降，實(shí)驗(yàn)8周可引起大鼠腎功能衰竭；治療劑量的FK506有一定的腎毒性，但各項(xiàng)指標(biāo)提示均為輕微損傷；與CsA和FK506相比，治療劑量的Rapa對(duì)大鼠腎功能及病理形態(tài)學(xué)改變最為輕微。
　　摘要2
　　目的：觀察腎移植術(shù)后首劑治療劑量的不同免疫抑制劑對(duì)獨(dú)腎模型大鼠大鼠睪丸發(fā)育及精子生成的影響，為腎移植術(shù)后免疫抑制劑治療方案的選擇提供參考依據(jù)

11、。
　　方法：按公式將腎移植患者術(shù)后患者的環(huán)孢素A（Cyclosporin A，CsA）、他克莫司（Tacrolimus，F(xiàn)K506）和雷帕霉素（Rapamycin，Rapa）的首劑治療劑量換算為大鼠的用藥劑量。構(gòu)建大鼠獨(dú)腎模型，將建模成功的40只大鼠隨機(jī)分為8組，分別為正常組、對(duì)照組、CsA（25mg/kg/d）組、FK506（0.8mg/kg/d）組和Rapa（0.2mg/kg/d）組，每組8只。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每周稱重2次，依據(jù)大

12、鼠體重調(diào)整胃飼藥物用量；試驗(yàn)結(jié)束后乙醚麻醉下抽取2ml血液，行性激素檢測(cè)；稱取右側(cè)腎臟及雙側(cè)睪丸重量，并計(jì)算臟器系數(shù)；制作睪丸組織勻漿懸液，精子計(jì)數(shù)，觀察精子活率及畸形率；HE染色觀察每組睪丸病理改變。透射電鏡觀察大鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)改變。
　　結(jié)果：
　　1、CsA組大鼠的雙側(cè)睪丸重量（2.63±0.57g）明顯少于其他各組大鼠(p<0.05)；
　　2、CsA組及Rapa組大鼠睪丸臟器系數(shù)、精子數(shù)量、精子活率低于對(duì)照組

13、及FK506組(p<0.05)；
　　3、各實(shí)驗(yàn)組精子畸形率高于對(duì)照組(p<0.05)，其中CsA組最為明顯（p<0.001）；
　　4、鏡下觀察：各實(shí)驗(yàn)組均有不同程度的病理學(xué)改變，表現(xiàn)為曲細(xì)精管管腔縮小、稀疏、生精細(xì)胞層數(shù)減少、腔內(nèi)精子減少、部分曲精小管出現(xiàn)空泡樣變，間質(zhì)細(xì)胞萎縮、水腫、出血等。其中CsA組病理改變最為明顯，F(xiàn)K506組曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)基本完整，僅部分分布稍稀疏，Rapa組大鼠部分曲細(xì)精管萎縮。
　　5、

14、超微結(jié)構(gòu)改變：超微結(jié)構(gòu)改變：正常對(duì)照組可見細(xì)胞核不規(guī)則，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)，線粒體嵴致密，可見高爾基體。治療劑量CsA組睪丸生精細(xì)胞及支持細(xì)胞細(xì)胞核不規(guī)則，線粒體嵴清晰，可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。FK506組睪丸生精細(xì)胞及支持細(xì)胞細(xì)胞核不規(guī)則，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)，線粒體嵴致密。Rapa組睪丸生精細(xì)胞及支持細(xì)胞核略有不規(guī)則，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張，線粒體嵴疏松，胞質(zhì)中可見溶酶體沉積。
　　結(jié)論：
　　1、腎移植術(shù)后首劑治療劑量的不同免疫抑制劑對(duì)大鼠睪丸發(fā)