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1、本文以κ-卡拉膠為原料,比較研究了PMA法(苯并四甲酸)、CTMS(三甲基氯硅烷)法和DMSO-甲醇法在硫酸多糖脫硫效果中的優(yōu)劣。結(jié)果發(fā)現(xiàn),κ-卡拉膠經(jīng)三種方法脫硫后,產(chǎn)物得率分別為62%、50.6%、36.7%;產(chǎn)物含硫量分別為4.6%、14.4%、14.1%;產(chǎn)物分子量分別為4.75kDa,22.3kDa,15.7kDa;結(jié)合紅外光譜分析表明,PMA法脫硫產(chǎn)物IR圖譜中1250cm-1(S=O伸縮振動(dòng))峰最小。結(jié)果說(shuō)明,PMA法脫硫
2、效果最好,產(chǎn)物得率最高,多糖降解率低,為一種理想的脫硫方法。
應(yīng)用PMA法對(duì)高硫酸根含量的λ-卡拉膠(每2個(gè)糖殘基含有3個(gè)硫酸酯基)進(jìn)行脫硫驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),瓜分析表明脫硫效果良好,進(jìn)一步對(duì)脫硫后多糖進(jìn)行酸法降解,應(yīng)用凝膠層析及離子交換色譜分離技術(shù)純化,采用Superdex peptide色譜柱分離脫硫寡糖:寡糖結(jié)構(gòu)采用電噴霧離子化質(zhì)譜(ESIMS)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,表明所得dsλ2-dsλ6寡糖為脫硫后的二糖至六糖半乳寡糖,且具備脫
3、硫λ-卡拉膠骨架結(jié)構(gòu)特征。通過(guò)糖芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn),脫硫前后寡糖與RCA120結(jié)合效率不同,表明硫酸基在糖與蛋白作用中具有重要貢獻(xiàn),也為該方法獲得脫硫多糖與寡糖,從事構(gòu)效關(guān)系研究提供了方法學(xué)基礎(chǔ)。
應(yīng)用PMA方法,對(duì)不同結(jié)構(gòu)海洋硫酸多糖如τ-卡拉膠、海蒿子硫酸化巖藻聚糖、裂弧菌硫酸半乳聚糖進(jìn)行脫硫?qū)嶒?yàn),應(yīng)用紅外光譜技術(shù)對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行脫硫效果分析,表明脫硫效果理想。在對(duì)τ-卡拉膠脫硫研究中發(fā)現(xiàn),當(dāng)在PMA法反應(yīng)中加入尿素后,可以優(yōu)先脫
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