成人淋巴瘤患者化療后胸腺反應(yīng)性增生及其在CD4+T細(xì)胞重建中的作用研究.pdf

1、第一部分成人淋巴瘤患者化療后胸腺反應(yīng)性增生PET/CT表現(xiàn)的回顧性研究
　　目的:成人化療后胸腺反應(yīng)性增生的發(fā)生率較低，容易被誤診為腫瘤殘留或疾病復(fù)發(fā)。本研究回顧性分析成人淋巴瘤患者化療前后胸腺PET/CT影像的變化，以更好地了解成人化療后胸腺增生的發(fā)生情況及其PET/CT影像特點(diǎn)。
　　方法:納入211例淋巴瘤患者，中位年齡為42(18～65)歲。分析化療前后PET/CT影像中是否存在胸腺組織18F-FDG代謝活性增高的表

2、現(xiàn)，同時(shí)采用胸腺指數(shù)對(duì)胸腺大小進(jìn)行評(píng)估。如化療后出現(xiàn)胸腺體積增大，F(xiàn)DG攝取值增加，同時(shí)沒有任何疾病復(fù)發(fā)的臨床、實(shí)驗(yàn)室及影像學(xué)依據(jù)即視為胸腺反應(yīng)性增生。
　　結(jié)果:27/211(12.8％)例患者化療后出現(xiàn)胸腺反應(yīng)性增生，中位年齡為28(18～53)歲，除3例發(fā)生于化療期間外，余24例胸腺增生發(fā)生于化療結(jié)束后1～10（中位4）個(gè)月。增生胸腺的FDG攝取為輕度彌漫性，SUVmax平均為2.6±0.9(1.2～5.3)。另外，化療前后

3、胸腺FDG攝取可隨時(shí)間發(fā)生動(dòng)態(tài)變化:治療期間胸腺FDG攝取值降低，而治療結(jié)束后胸腺增生時(shí)FDG攝取恢復(fù)，并超過(guò)化療前水平。定期隨訪發(fā)現(xiàn)隨訪時(shí)間超過(guò)9個(gè)月以上者胸腺體積和密度均有不同程度減少。除1例出現(xiàn)早期復(fù)發(fā)外余患者均獲無(wú)病生存，提示預(yù)后良好。
　　結(jié)論:化療后胸腺反應(yīng)性增生可見于年輕的成人患者，表現(xiàn)為化療后胸腺體積增大同時(shí)FDG攝取值輕度增加。本研究對(duì)其發(fā)生情況及PET/CT影像特點(diǎn)的認(rèn)識(shí)將有助于避免臨床誤診及過(guò)度治療。

4、　　第二部分成人淋巴瘤患者化療后胸腺體積和功能的變化
　　目的:目前對(duì)成人化療后胸腺的再生情況認(rèn)識(shí)較少，且主要基于對(duì)胸腺影像及初始T細(xì)胞數(shù)量的研究，具有局限性。本研究結(jié)合胸腺影像及胸腺功能指標(biāo)信號(hào)接合T細(xì)胞受體重排刪除環(huán)（sjTREC）和CD31+胸腺近期輸出細(xì)胞(CD31+RTE)分析化療對(duì)成人胸腺的影響及化療后胸腺的再生情況。
　　方法:納入初診B細(xì)胞淋巴瘤患者84例，通過(guò)增強(qiáng)CT觀察胸腺形態(tài)和大小、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD3

5、+CD4+CD45RA+CD31+表型及實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中sjTREC的拷貝數(shù)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)化療前后胸腺體積和輸出功能的變化，評(píng)估胸腺反應(yīng)性增生的發(fā)生情況及其對(duì)胸腺輸出功能的影響。
　　結(jié)果:(1)低齡的成人淋巴瘤患者（18～51歲，中位30歲）化療后可出現(xiàn)胸腺反應(yīng)性增生，其胸腺大小隨化療開始及結(jié)束發(fā)生動(dòng)態(tài)變化:除2例化療期間出現(xiàn)胸腺體積增大外，余患者胸腺體積均在化療期間縮小或維持不變，而在化療結(jié)束后1～12（

6、中位4）個(gè)月時(shí)增大;(2)外周血sjTREC含量和CD31+ RTE計(jì)數(shù)亦隨化療開始和結(jié)束發(fā)生動(dòng)態(tài)變化:兩者在化療后均下降，至化療6個(gè)周期后降至最低點(diǎn)(P=0.018和P=0.002)，后緩慢回升;兩者分別于化療結(jié)束6個(gè)月和9個(gè)月時(shí)顯著升高(P＜0.001)，并達(dá)基線水平;(3)根據(jù)化療后胸腺體積的變化將年輕患者分為胸腺增生組(n=29)和無(wú)胸腺增生組(n=30)，兩組在性別、年齡、疾病類型、治療方案、隨訪時(shí)間、治療前胸腺體積及功能指標(biāo)

7、（CD31+ RTE和sjTREC）均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。比較兩組化療后胸腺輸出功能的變化發(fā)現(xiàn)，化療結(jié)束6個(gè)月后各時(shí)期胸腺增生組外周血sjTREC含量和CD31+ RTE計(jì)數(shù)均顯著高于非胸腺增生組(P＜0.05)，提示化療后胸腺增生者的胸腺輸出功能恢復(fù)更快;(4)進(jìn)一步比較兩組臨床特征發(fā)現(xiàn)，胸腺增生組患者的疾病分期更早(P=0.026)，且治療療效及治療后無(wú)進(jìn)展生存期均優(yōu)于非胸腺增生組(P=0.024，0.035)。
　　

8、結(jié)論:成人淋巴瘤患者化療后胸腺亦具有一定的再生能力，尤其是在低齡的成人患者，表現(xiàn)為胸腺體積增大及胸腺輸出功能增加?；熀蟪霈F(xiàn)胸腺增生的患者胸腺輸出功能恢復(fù)更快，其預(yù)后優(yōu)于無(wú)胸腺增生的患者。
　　第三部分成人淋巴瘤患者化療后胸腺反應(yīng)性增生在CD4+T細(xì)胞重建中的作用
　　目的:成人淋巴瘤患者化療后胸腺輸出途徑在CD4+T細(xì)胞重建中的作用尚待進(jìn)一步明確。本研究動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)成人淋巴瘤患者化療后胸腺形態(tài)的變化，評(píng)估化療后成人胸腺的再生情

9、況及其在CD4+T細(xì)胞重建中的作用。
　　方法:將59例年輕的成人淋巴瘤患者按化療后是否出現(xiàn)胸腺反應(yīng)性增生分為胸腺增生組(n=29)和無(wú)胸腺增生組(n=30)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD4+T細(xì)胞及其各亞群，即CD45RA+CCR7+初始(naive)T細(xì)胞、CD45RA-CCR7+中央記憶性(central memory，CM)T細(xì)胞、CD45RA℃CR7-效應(yīng)記憶性(effector memory，EM)T細(xì)胞及CD45RA+C

10、CR7-終末分化的效應(yīng)記憶性(CD45RA expressing effector memory，EMRA)T細(xì)胞的比例，并檢測(cè)CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatoryT cells，Treg）及其各亞群，即天然性Treg(naturalTreg，nTreg)和誘導(dǎo)性Treg（induced Treg，iTreg）的比例，計(jì)算外周血中上述各亞群的數(shù)量。比較兩組化療后naive CD4+T細(xì)胞和nTreg細(xì)胞數(shù)量恢復(fù)情況，評(píng)估化療后胸腺

11、反應(yīng)性增生對(duì)兩者重建的影響。
　　結(jié)果:(1)總CD4+T細(xì)胞和CD4+ Treg數(shù)量均在化療6個(gè)周期結(jié)束時(shí)降至最低(P＜0.001)，治療結(jié)束后9個(gè)月時(shí)顯著回升(P=0.001和P=0.021)，至治療結(jié)束后1年時(shí)CD4+T細(xì)胞恢復(fù)達(dá)初診水平，而CD4+ Treg細(xì)胞計(jì)數(shù)仍低于基線水平（P=0.045）;(2)分析CD4+T細(xì)胞亞群的變化發(fā)現(xiàn):化療后na(i)veCD4+T細(xì)胞數(shù)量和比例均減低（P=0.001和P=0.003），

12、治療結(jié)束后逐漸升高，至治療結(jié)束后1年時(shí)達(dá)初診水平;化療后記憶CD4+T細(xì)胞中TEM亞群數(shù)量亦下降（P=0.044），而TCM亞群數(shù)量無(wú)減少，記憶CD4+T細(xì)胞包括TEM和TCM亞群的比例均顯著升高(P=0.035和P=0.036)，至治療結(jié)束后1年時(shí)回降至初診水平;(3)分析CD4+ Treg各亞群的變化發(fā)現(xiàn):治療結(jié)束后nTreg和iTreg數(shù)量均降低，且nTreg比例減低（P＜0.05）;治療結(jié)束后9個(gè)月時(shí)兩者數(shù)量均顯著回升，nTre

13、g比例亦回升(P＜0.05);至治療結(jié)束后1年時(shí)iTreg數(shù)量達(dá)基線水平，而nTreg數(shù)量仍低于基線水平（P=0.030）;(4)比較有和無(wú)胸腺增生患者化療后naive CD4+T細(xì)胞及nTreg的重建情況發(fā)現(xiàn)，胸腺增生組和無(wú)胸腺增生組naive CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)分別于治療結(jié)束后6個(gè)月和9個(gè)月時(shí)顯著回升（P=0.031和P=0.037）;另外，胸腺增生組nTreg計(jì)數(shù)在治療結(jié)束后6個(gè)月時(shí)顯著回升(P=0.028)，而無(wú)胸腺增生組在化療

14、后各時(shí)期nTreg計(jì)數(shù)均無(wú)顯著回升（P＞0.05）。
　　結(jié)論:成人淋巴瘤化療后外周血CD4+T細(xì)胞(包括傳統(tǒng)CD4+T細(xì)胞和CD4+Treg)數(shù)量減少，其中尤以na(i)ve T細(xì)胞及nTreg亞群減少顯著，且化療后重建較慢。胸腺增生者naive CD4+T細(xì)胞和nTreg的重建更快，提示胸腺輸出可能是低齡成人患者化療后CD4+T細(xì)胞重建的重要途徑。
　　第四部分 CD127基因多態(tài)性與化療后胸腺反應(yīng)性增生的關(guān)系
　

15、　目的:IL-7Rα(CD127)基因多態(tài)性與化療后T細(xì)胞胸腺發(fā)育及免疫重建的關(guān)系尚不明確。本研究分析淋巴瘤患者CD127基因多態(tài)性與化療后胸腺反應(yīng)性增生的發(fā)生和CD4+T細(xì)胞重建的關(guān)系。
　　方法:納入成人B細(xì)胞淋巴瘤患者134例，按化療后有無(wú)胸腺增生分為胸腺增生組(n=38)和非胸腺增生組(n=96)。選取CD127基因內(nèi)4個(gè)標(biāo)簽SNP，分別為位于啟動(dòng)子區(qū)的rs7718919、rs11567685、rs11567686及6號(hào)外

16、顯子區(qū)的rs6897932，直接測(cè)序法對(duì)SNP位點(diǎn)進(jìn)行基因分型，并比較SNP基因型、等位基因型及單倍型在兩組的分布情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD4+T細(xì)胞亞群的比例，比較具有不同單倍型患者治療結(jié)束后CD4+T細(xì)胞數(shù)量的變化。
　　結(jié)果:(1)除rs11567686外，rs7718919、rs11567685及rs6897932三個(gè)位點(diǎn)基因型及等位基因型分布均符合哈迪-溫伯格平衡;(2)胸腺增生組rs7718919位點(diǎn)出現(xiàn)T等位基因

17、和TT+GT基因型的頻率顯著高于無(wú)胸腺增生組(P=0.031，0.027);兩組間rs11567685和rs6897932基因型和等位基因型的分布無(wú)差異(P＞0.05);(3) rs7718919與rs6897932之間存在較強(qiáng)的連鎖不平衡(D'=0.99)。對(duì)兩個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行單倍型(haplotype)分析發(fā)現(xiàn)hap3（rs7718919為T）在胸腺增生組的出現(xiàn)頻率顯著高于無(wú)胸腺增生組(0.211 vs0.109，P=0.030)，余單倍