3-MA對化療藥誘導NK-T細胞淋巴瘤細胞株凋亡作用的研究.pdf

1、目的：NK/T細胞淋巴瘤是一類好發(fā)生于鼻部及其周圍組織的惡性度較高的淋巴瘤，該病患者預后較差，生存期比較短，對常規(guī)的化療方案敏感性較差，且易于復發(fā)。有效的化療仍有利于提高CR率，降低復發(fā)可能，特別是對于晚期患者和伴有鼻外病變的患者。目前傳統(tǒng)的化療方案常規(guī)治療的療效欠佳，需要探索更有效的藥物治療方案以提高治療的有效率，延長患者的生存期。
　　方法:培養(yǎng)NK/T細胞淋巴瘤細胞，分組（A:長春瑞濱+表柔比星+3-甲基腺嘌呤、B:長春瑞濱

2、+表柔比星、C:長春瑞濱+多柔比星+3-甲基腺嘌呤、D:長春瑞濱+多柔比星、E:多西他賽+表柔比星+3-甲基腺嘌呤、F:多西他賽+表柔比星、G:多西他賽+多柔比星+3-甲基腺嘌呤、H:多西他賽+多柔比星、I:3-甲基腺嘌呤、J:細胞對照）加藥處理細胞，培養(yǎng)24小時后收集細胞，裂解細胞后提取細胞蛋白質，進行蛋白質印跡試驗（免疫印跡試驗），以β-肌動蛋白作為內參照，應用image J軟件分析灰度值，檢測自噬蛋白Beclin-1、LC3II表

3、達情況；收集不同藥物組作用24小時的細胞，應用流式細胞儀檢測細胞凋亡情況，以研究自噬抑制劑聯(lián)合化療藥物對NK/T細胞淋巴瘤細胞株的誘導凋亡作用，為NK/T細胞淋巴瘤臨床化療方案的選擇提供實驗室依據(jù)。
　　結果：長春瑞濱、多柔比星、多西他賽和表柔比星4種化療藥及自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤聯(lián)合方案處理NK/T細胞淋瘤細胞，細胞內自噬蛋白表達的情況：化療藥物組高于細胞對照組，3-甲基腺嘌呤組低于細胞對照組，化療藥物組高于化療聯(lián)合3-MA組

4、，兩兩相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；流式細胞儀檢測細胞凋亡，細胞凋亡率的大小由高到低依次為：A、B、E、F、G、H、C、D、I、J，在雙變量流式細胞儀的散點圖上，實驗組的右象限(Q2、4)可見不同比例的凋亡細胞，與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：化療藥物作用于NK/T細胞淋巴瘤細胞株，能引起瘤細胞的保護性自噬，自噬相關蛋白Beclin-1和LC3II表達增高；3-甲基腺嘌呤有效抑制NK/T細胞淋