單純經(jīng)皮注射RhBMP-2治療大鼠閉合性骨折的時間窗研究.pdf

1、目的：骨折、骨缺損、骨不連的治療和預(yù)防是骨科領(lǐng)域的熱門課題。新的骨生長因子治療與傳統(tǒng)治療方法聯(lián)合使用可以增強骨折愈合。骨折過程不僅受到機體各種條件的影響，還受到局部各種生長因子調(diào)節(jié)，骨形態(tài)發(fā)生蛋白家族（BMPs）是關(guān)鍵的調(diào)質(zhì)，其中BMP-2顯示出具有廣泛的增強或加速骨折愈合的能力。而在大多數(shù)研究中，BMP-2雖然已用于手術(shù)當同，但要產(chǎn)生顯著的臨床療效則需要使用相對較高的劑量，特別是在大型動物和靈長類。本課題在于考察用緩沖液作為載體，何時

2、給予rhBMP-2于骨折部位能更佳地促進骨折修復(fù)，初步比較不同劑量rhBMP-2在這些時間的效果差異。 方法：48只雄性SD大鼠行右股骨骨折內(nèi)固定術(shù)后被隨機分成8組，每組6只，Ⅰ組為完全空白對照組，不給予注射任何試劑；Ⅱ組為空白對照組，在第0天經(jīng)皮局部注射25μl緩沖液；組Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ在術(shù)后0、4、8天經(jīng)皮局部注射25μl緩沖液及10μg rhBMP-2；組Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ在術(shù)后0、4、8天經(jīng)皮局部注射25μl緩沖液及20μg rhBM

3、P-2。依次在0、8、16、24天DR拍片觀察骨折愈合情況。在第24天將大鼠處死，取出髓內(nèi)針，獲右側(cè)股骨，標本HE染色作光鏡觀察。采用圖像軟件ImageJ（1.41o版）作圖像分析獲得骨折間隙像素灰度值（PGL）變化數(shù)據(jù)。采用SPSS（15.0 for Windows版本）統(tǒng)計學(xué)軟件雙因素重復(fù)實驗的方差分析（LSD、SNK及Post Hoc）法檢驗。 結(jié)果：影像學(xué)及統(tǒng)計學(xué)顯示，組Ⅲ、Ⅷ、Ⅴ、Ⅳ骨折愈合明顯優(yōu)于組Ⅰ、Ⅱ及Ⅶ、Ⅵ（1

4、6天和24天）。不同組和不同天注射效果差異顯著（p<0.01），這兩個因素存在交互作用（p<0.01）。隨著骨折愈合進程，各組的鄰近未受損骨相對骨折問隙的PGL差值都在降低，至第8天各組間未見明顯差異，僅Ⅶ組降低幅度較少。從8天至16天，Ⅳ、Ⅷ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅵ組PGL差值繼續(xù)減少，Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ卻有少量增加；到16日，PGL差值達到最低的是Ⅷ組，其次是Ⅴ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅰ組；至24天，Ⅲ組PGL差值達到最低，其次是Ⅷ、Ⅴ組。組Ⅲ與Ⅳ差異不顯著；組Ⅴ與

5、Ⅵ差異顯著（p<0.05），組Ⅵ骨折愈合優(yōu)于組Ⅴ；組Ⅶ與Ⅷ差異顯著（p<0.05），組Ⅷ骨折愈合優(yōu)于組Ⅶ。組織學(xué)顯示在骨折后8天經(jīng)皮注射rhBMP-2及緩沖液明顯加速了骨折愈合，Ⅷ、Ⅶ組骨痂進入改造塑形期，骨折斷端間形成牢固的編織骨。在骨折后0、4天注射也加速了骨折愈合，但骨折間隙未良好形成新生骨。Ⅲ、Ⅳ組有纖維性骨痂形成，纖維組織和軟骨都不典型，各占一半，新骨組織未完全形成；Ⅴ、Ⅵ組有骨痂形成，隆起，無纖維組織，軟骨量少。對照組Ⅰ、Ⅱ