柚皮苷對去勢大鼠骨質(zhì)疏松性骨折愈合的影響.pdf

1、目的：通過影像學(xué)、組織學(xué)、骨密度及生物力學(xué)檢查，探討柚皮苷對去勢大鼠骨質(zhì)疏松性骨折愈合過程的影響。
　　方法：1.骨質(zhì)疏松模型的建立:選取50只成年雌性SD大鼠，隨機(jī)分成去勢組(OVX)40只，假手術(shù)組(SHAM)10只。去勢組在無菌條件下經(jīng)背側(cè)摘除雙側(cè)卵巢，假手術(shù)組找到卵巢后不切除，只切除同重量的脂肪組織。
　　2.骨質(zhì)疏松性骨折模型的建立:確定骨質(zhì)疏松模型建立成功后，在無菌條件下，對所有大鼠進(jìn)行左股骨干中段骨折造模。在股

2、骨中段行橫行截骨，制作橫行骨折模型，用克氏針?biāo)鑳?nèi)固定。
　　3.給藥方法和劑量:再將制成骨折模型的40只大鼠，隨機(jī)分成骨質(zhì)疏松模型空白組(OVX+N)和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組(OVX+L/M/H)，三個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別予以柚皮苷（低劑量組1 mg/kg，中劑量組10 mg/kg，高劑量組100 mg/kg）灌服，對照組及模型組給予同體積的雙蒸水灌服，共4周。
　　4.實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)
　　4.1骨密度檢查:OVX術(shù)后飼養(yǎng)12周，行雙能X線骨

3、密度檢查，驗(yàn)證骨質(zhì)疏松模型建立。
　　4.2影像學(xué)觀察:OPF術(shù)后即刻、4、8周，用術(shù)中用C型臂X光機(jī)機(jī)行X片檢查，觀察髓內(nèi)針位置和骨折斷端愈合情況。
　　4.3骨痂組織學(xué)檢查:OPF術(shù)后8周，處死5只大鼠，取骨折處骨痂組織（含骨折斷端，長約3 cm的骨組織），將組織固定---脫鈣---包埋---切片---HE染色，光鏡下行組織學(xué)觀察。
　　4.4生物力學(xué)測量:取術(shù)側(cè)股骨，剔除軟組織，拔除髓內(nèi)針。采用萬能材料試驗(yàn)機(jī)行三

4、點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)，測量最大承載負(fù)荷。
　　結(jié)果：1.骨密度檢查:卵巢切除術(shù)后12周行骨密度測定，OVX組BMD顯著低于Sham組(P＜0.05)，體重明顯高于Sham組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，說明骨質(zhì)疏松模型建立。
　　2.影像學(xué)觀察結(jié)果:OPF術(shù)后即刻X線檢查示，各組股骨骨折斷端對位對線均良好，未見明顯差異。OPF術(shù)后4周X線顯示:Sham組骨折線稍顯模糊，斷端仍有透亮線存在，有大量骨痂形成;OVX+M、H兩組骨折

5、線清晰，有少量骨痂形成;OVX及OVX+L兩組骨折線清晰，較少骨痂形成。OPF術(shù)后8周X線顯示:Sham組骨折線模糊，有連續(xù)骨痂通過骨折斷端;OVX+H、M、L三組骨折線稍顯模糊，有大量骨痂形成，生成骨痂大小依次為H＞M＞L; OVX組骨折斷端仍有透亮線存在，骨折斷端為纖維性軟骨痂。
　　3.骨痂組織學(xué)檢查:術(shù)后8周Sham組見成熟板狀骨中大量成熟骨小梁形成，骨小粱較粗且排列致密有序，數(shù)目較多，排列方向與主應(yīng)力方向一致;OVX+M

6、組骨折處軟骨內(nèi)成骨清晰可見，局部編織骨向板層骨過度，原始骨小梁逐漸改建成為成熟骨小梁，數(shù)目較少，粗細(xì)不均且排列紊亂，與主應(yīng)力方向不一致，互相交錯(cuò)成網(wǎng)狀;OVX+L、M兩組有大量原始骨小梁，且骨小梁較細(xì)，間隙較大，排列方向不均勻，骨小梁周邊成骨細(xì)胞和骨細(xì)胞較多;OVX組軟骨痂周邊部軟骨細(xì)胞出現(xiàn)變性壞死，并開始出現(xiàn)少量原始小梁狀骨，原始小梁狀骨邊成骨細(xì)胞數(shù)較少，原始骨小梁間為結(jié)締組織。
　　4.生物力學(xué)檢查:術(shù)后8周，實(shí)驗(yàn)組的左側(cè)股骨

7、的三點(diǎn)彎曲載荷均高于OVX組，但均低于Sham組，具體為:Sham組＞OVX+H組＞OVX+M組＞OVX+L組＞OVX組，Sham組與其余四組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，OVX組與OVX+H及OVX+M差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，OVX組與OVX+L差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：1.柚皮苷對去卵巢大鼠OPF有促進(jìn)骨折愈合的作用，且可能存在一定的劑量依賴關(guān)系。
　　2.雙側(cè)卵巢切除方法制造骨質(zhì)疏