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1、中國農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文小麥苗期熱脅迫基因表達譜分析及相關(guān)基因的克隆姓名:彭丹輝申請學位級別:碩士專業(yè):作物遺傳育種指導(dǎo)教師:彭惠茹20050601AbstractWheatisoneofthemostimportantcerealcropsinChinaInrecentyears,theglobalaveragetemperaturehasincreasedduetotheenhanced“GreenhouseEffect’,heat
2、stresshascometobeoneofthesedousclimaticthreatsforwheatproductionandcausesscverceconomiclossesHoweverthemolecularbasisofcropsadaptationtohightemperatureisnotcompletelychmacterizedTheaimofthissmdyistoanalyzethegeneexpressi
3、onprofileofwheatinresponsetoelevatedtemperatureandisolatethegenesinducedbyheatstressTodefinewheatmolecularresponsetoelevatedgrowthtemperaturesgeneexpressionprofileswereexaminedsubjectedtoheatsUessbyusingAffymetrix22kBarl
4、eylGenechipcRNAde巾edflomheattreatedwheatseedling(38℃for1hoⅢ丑s)andunUeatedwheatseedUng(C碼wereusedtohybddizedtwochipsrespectivelyAsaresult8486probesetsproducedpresentcallsinth06etwochipscovered372%oftotal22840probesetsAmon
5、gthemapproximately105%(n=s92)probesetsweresignificantlyupordownregulated(璐tal12andpvalue‘o05)SendquandtstiveRTPCRandRealtimeRTPCRwut≈usedtoverifythehybridizationresultAmongthe12geneswehaveexamined,11genesexhibitedthesimi
6、larresultswiththechipsSowebelievethatthechipsresultiscredibleAnalysisshowedthedifferentiallyexpressedgenesInvolvedinStle镕response,signaltransduction,transport,photosynthesispxoteinmetabolism,l歸membolismandcarbohydratemet
7、abolismetcAsexpected,alargenumberofthegeneshomologoustoknownchaperonesandheatshockproteinsinotherorganismswerehighlyinducedInadditionserialpredictedgenesincludingthoseencodingkeycm呵m%inUbiqultinPmteasomepathwayhaddiffere
8、ntiallyexpressedThecompleteORFoftwoheatinducedgeneswegecloedbyinsilicocloningmethodBioinformaticanalysisshowedthatonesequenceisencodingacalciumdependedpmte/nkinase(CDPl0andanotherisencodingaSer/IhrproteinkinaseInaddition
9、onemyristoylationsitewasdetectedintheNterminalofthepredictedCDPKandtwonucleartargetingsignalsequenceswasfoundintheNqerminalofthepredictedSeffrhrproteinkinaseThisresultindicatethoseCDPKandSer/Thrproteinkinasewouldbeanchor
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