小麥抗寒相關基因克隆及序列特征分析.pdf

1、低溫傷害不僅會限制農(nóng)作物的栽種范圍，也會造成農(nóng)作物減產(chǎn)。每年全世界因低溫冷害造成的農(nóng)作物損失多達數(shù)千億元，研究并提高植物抗寒力具有重要的理論意義和現(xiàn)實意義。為了闡明冷誘導基因與小麥幼苗抗寒性的關系，本文選取來自于全國各個麥區(qū)及部分外引種質共260份小麥資源，進行了幼苗抗寒性鑒定及冷誘導基因STS檢測。根據(jù)NCBI上公布的24個冷誘導基因的mRNA序列，分別設計引物對260份材料進行擴增，結果表明：Wrab19（登錄號：AF139915）

2、、Wcs19（登錄號：L13437）、Wrab17(登錄號：AF255053)三個冷誘導基因與小麥抗寒性有一定關聯(lián)，主要結果如下：
　　 1．實驗室抗寒性鑒定結果表明，260個品種的抗寒性分布廣泛，品種間差異極顯著，所有品種的抗寒性變幅為0.0～1.0，表現(xiàn)出較為明顯的表型差異。
　　 2.利用所設引物對Wrab19基因進行擴增時，表現(xiàn)出較好的多態(tài)性，260份材料中，133個品種擴增出兩條帶，長度分別為690bp和 12

3、00bp；127個品種擴增出一條帶，長度為690bp。隨機挑選4個抗寒性不同的品種進行測序，品種名稱為Serra、02Y151、宿9908、CP93181115，其中前兩個品種序列與目的序列基本一致，而后兩個品種序列在222bp處多出一段33bp的序列，推測可能是等位基因。
　　 3．利用引物對260份材料進行wcs19基因檢測，結果發(fā)現(xiàn)，該引物特異性較好，但在品種間沒有多態(tài)性，260份材料均檢測出wcs19基因。進一步的序列分

4、析表明，wcs19基因DNA序列含有一段121122bp的內含子，且該內含子序列中包含一個SNP，即，內含子序列+9bp 處G堿基的插入和缺失，此內含子及內含子中的SNP與幼苗抗寒性的關系還需進一步研究確定。
　　 4．利用所設引物對wrab17基因進行擴增時，引物擴增特異性較好，預計目標片段468bp，但實際擴增出610bp的片段，同時在品種間沒有出現(xiàn)多態(tài)性，260份材料均檢測出wrab17基因。隨機選取兩個抗寒性不同的品種進